Inmunosensor fluorescente con nanopartículas de ZnO y quitosano para el diagnóstico serológico de toxoplasmosis

Autores: Victoria Medawar Aguilar; Jofre, Claudio Francisco; Fernández Baldo, Martín Alejandro; Raba, Julio; Pereira, Sirley Vanesa; Messina, Germán Alejandro
Año de publicación: 2017
Idioma: español castellano
Tipo de recurso: documento de conferencia
Estado: versión publicada
Descripción: Toxoplasmosis es una zoonosis, causada por Toxoplasma gondii, un parásito protozoario de distribución global siendo una patología generalmente asintomática, y que puede causar variados problemas de salud [1, 2]. En este trabajo se describe un inmunosensor microfluídico con detección LIF para la determinación cuantitativa de anticuerpos IgG específicos anti-T-gondii. La detección serológica de estos anticuerpos juega un papel clave en el diagnóstico clínico de toxoplasmosis. Para llevar a cabo la determinación de dichos anticuerpos, se sintetizaron por vía húmeda nanopartículas de óxido de zinc (ZnO-NPS), se cubrieron con quitosano y luego se utilizaron para inmovilizar antígenos en el canal microfluídico central. Se inyectaron muestras de suero conteniendo anticuerpos IgG anti-T-gondii, los cuales reaccionaron inmunológicamente con los antígenos inmovilizados. Los anticuerpos unidos fueron cuantificados mediante la adición de anticuerpos secundarios anti-IgG marcados con fosfatasa alcalina (FAL) que en presencia de fosfato de 4-metilumbeliferilo (4-MUP) no fluorescente se convirtió en metilumbeliferona cuya fluorescencia se midió empleando una longitud de onda de excitación de 355 nm y de emisión de 440 nm. La respuesta fluorescente relativa de metilumbeliferona fue proporcional a la concentración de anti-T. Gondii IgG en el intervalo de 0 a 200 U.mL-1. El límite de detección obtenido para nuestro dispositivo fue 3,9 x10-4 U mL-1. Los coeficientes de variación fueron inferiores al 4,27% para los ensayos intra-día, e inferiores al 6,76% para los ensayos inter-día. Los resultados obtenidos por el inmunosensor con detección LIF tuvieron buena correlación con aquellos obtenidos por el método ELISA, lo que sugiere que el sensor diseñado representa una herramienta prometedora para la determinación cuantitativa de anticuerpos anti-T. gondii en muestras clínicas.
Fil: Victoria Medawar Aguilar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentina
Fil: Jofre, Claudio Francisco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentina. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Departamento de Química. Área de Química Analítica; Argentina
Fil: Fernández Baldo, Martín Alejandro. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentina
Fil: Raba, Julio. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Departamento de Química. Área de Química Analítica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentina
Fil: Pereira, Sirley Vanesa. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Departamento de Química. Área de Química Analítica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentina
Fil: Messina, Germán Alejandro. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Departamento de Química. Área de Química Analítica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentina
9º Congreso Argentino Química Analítica
Río Cuarto
Argentina
Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Físico-Químicas y Naturales
Asociación Argentina de Químicos Analíticos
Materia: Inmunosensor fluorescente
nanoparticulas de ZnO
toxoplasmosis
Nivel de accesibilidad: acceso abierto
Condiciones de uso: https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
Repositorio
Institución: Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
OAI Identificador: oai:ri.conicet.gov.ar:11336/290281

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Para llevar a cabo la determinación de dichos anticuerpos, se sintetizaron por vía húmeda nanopartículas de óxido de zinc (ZnO-NPS), se cubrieron con quitosano y luego se utilizaron para inmovilizar antígenos en el canal microfluídico central. Se inyectaron muestras de suero conteniendo anticuerpos IgG anti-T-gondii, los cuales reaccionaron inmunológicamente con los antígenos inmovilizados. Los anticuerpos unidos fueron cuantificados mediante la adición de anticuerpos secundarios anti-IgG marcados con fosfatasa alcalina (FAL) que en presencia de fosfato de 4-metilumbeliferilo (4-MUP) no fluorescente se convirtió en metilumbeliferona cuya fluorescencia se midió empleando una longitud de onda de excitación de 355 nm y de emisión de 440 nm. La respuesta fluorescente relativa de metilumbeliferona fue proporcional a la concentración de anti-T. Gondii IgG en el intervalo de 0 a 200 U.mL-1. El límite de detección obtenido para nuestro dispositivo fue 3,9 x10-4 U mL-1. 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