Evaluación de aditivos dietarios sobre la morfología yeyunal en explantes porcinos desafiados con Lawsonia intracellularis
- Autores
- Mozo, Joaquín; Martínez, Guadalupe; Decundo, Julieta María; Eguia, Valeria Raquel; Dieguez, Susana Nelly; Soraci, Alejandro Luis; Pérez, Denisa Soledad
- Año de publicación
- 2025
- Idioma
- español castellano
- Tipo de recurso
- documento de conferencia
- Estado
- versión publicada
- Descripción
- Lawsonia intracellularis es una bacteria Gram negativa intracelular obligada, causante de la enteropatía proliferativa porcina, una patología de alta prevalencia en sistemas intensivos de producción porcina. Esta enfermedad afecta principalmente a cerdos en crecimiento y finalización, provocando lesiones hiperplásicas en las criptas intestinales, reducción de la altura de las vellosidades, infiltración inflamatoria y compromiso de la función de barrera epitelial, con impacto negativo sobre la ganancia de peso y conversión alimenticia1,2. En el contexto actual, en el que se busca reducir el uso de antimicrobianos como estrategia frente a la resistencia antimicrobiana, resulta fundamental explorar aditivos nutricionales con propiedades inmunomoduladoras, antiinflamatorias o protectoras de la mucosa intestinal. Entre ellos, la inulina (IN), un fructano fermentable que estimula el crecimiento de bacterias beneficiosas y la producción de ácidos grasos de cadena corta, los aceites esenciales (AE) de Lippia origanoides y Eugenia caryophyllata, reconocidos por su actividad antimicrobiana y antioxidante, y el humato de sodio (HS), capaz de formar una película protectora sobre la superficie epitelial limitando la interacción patógeno-huésped, se presentan como alternativas prometedoras.El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de dichos aditivos, individualmente o combinados, sobre explantes yeyunales porcinos desafiados ex vivo con L. intracellularis. Se utilizaron explantes de 1,3 cm² provenientes de 10 lechones destetados alimentados con dieta basal sin aditivos. Los tejidos fueron montados sobre esponjas estériles con las vellosidades orientadas hacia arriba e incubados durante 24 h (n=4) en medio de cultivo bajo distintas condiciones experimentales: control doble negativo (medio solo), aditivos solos (IN; AE-HS; IN+AE-HS), control positivo con L. intracellularis (LAW) y tratamientos con LAW más cada uno de los aditivos. Posteriormente, se realizaron tinciones con hematoxilina-eosina (H&E) y ácido periódico de Schiff (PAS) para analizar digitalmente parámetros histomorfológicos: altura y ancho de vellosidades (Vh, Vw), profundidad y ancho de criptas (Cd, Cw), área de absorción intestinal (AAI), relación Vh/Cd y número de células caliciformes (Cc).El análisis estadístico se realizó mediante la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis seguida del test de Dunn (α=0,05) con software RStudio (versión 4.5.0). Los resultados se muestran en la tabla 1. No se observaron diferencias significativas para AAI (p=0,24) ni Cc (p=0,33), mientras que sí se detectó un efecto significativo para la variable Vh/Cd (p=0,01). La exposición a LAW redujo significativamente esta relación (1,83 ± 0,47) en comparación con el control (2,61 ± 0,58), lo que evidencia atrofia vellosa severa, consistente con lo reportado en modelos experimentales de infección por esta bacteria1. La suplementación con IN sola incrementó significativamente la relación Vh/Cd respecto al control (3,83 ± 0,84 vs. 2,61 ± 0,58), sugiriendo un posible efecto trófico sobre las vellosidades yeyunales. Sin embargo, en los explantes desafiados con LAW, los aditivos IN (1,85 ± 0,16), AE-HS (1,85 ± 0,19) y la combinación IN+AE-HS (1,88 ± 0,34) no lograron revertir el daño inducido por la bacteria, aunque mostraron una tendencia a valores levemente superiores respecto al grupo LAW solo (1,83 ± 0,47).Estos resultados sugieren que, si bien los aditivos en estudio presentan potencial para mejorar la morfología intestinal en condiciones basales, su efecto protector frente a la infección aguda por L. intracellularis parece limitado en este modelo ex vivo. Es posible que el tiempo de exposición (24 h) no haya sido suficiente para observar efectos inmunomoduladores sostenidos, o que se requiera una combinación con otros compuestos de acción sinérgica. Además, la naturaleza intracelular de L. intracellularis implica que los mecanismos patogénicos no se limitan a una acción local en la superficie epitelial, sino que comprometen vías intracelulares relacionadas con la proliferación celular, inflamación y alteración del ciclo celular. Esto podría explicar la falta de eficacia de compuestos que actúan predominantemente sobre la microbiota o la superficie epitelial. Adicionalmente, debe considerarse que la infección con L. intracellularis induce una respuesta proliferativa celular compleja, lo cual podría dificultar la reversión del daño estructural mediante aditivos de acción principalmente prebiótica o antimicrobiana indirecta.Cabe destacar que, si bien los explantes intestinales no reproducen completamente la complejidad del sistema inmune in vivo, estudios previos han demostrado que este modelo permite detectar respuestas inflamatorias e inmunitarias locales ante el desafío con L. intracellularis3. Por lo tanto, la falta de reversión del daño morfológico observada en este estudio no se atribuye a una ausencia total de respuesta inmune en los explantes, sino posiblemente a la intensidad del daño inducido por la bacteria o a la insuficiencia de los aditivos para modular eficazmente esta respuesta en condiciones agudas.En conclusión, aunque IN mostró un efecto trófico significativo en ausencia del patógeno, los resultados ex vivo no demostraron un efecto protector robusto frente al daño morfológico inducido por L. intracellularis. Estudios in vivo de mayor duración y con evaluación funcional adicional (como expresión génica o integridad de la barrera intestinal) serán necesarios para determinar el verdadero potencial de estos aditivos como herramientas no antibióticas frente a esta enteropatía de importancia productiva.
Fil: Mozo, Joaquín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencia Veterinarias. Departamento de Fisiopatología. Laboratorio de Toxicología; Argentina
Fil: Martínez, Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
Fil: Decundo, Julieta María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
Fil: Eguia, Valeria Raquel. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencia Veterinarias. Departamento de Fisiopatología. Laboratorio de Toxicología; Argentina
Fil: Dieguez, Susana Nelly. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
Fil: Soraci, Alejandro Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
Fil: Pérez, Denisa Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
XXV Jornada de divulgación Técnico - Científica de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional de Rosario
Rosario
Argentina
Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Veterinarias - Materia
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LAWSONIA INTRACELLULARIS
ADITIVOS NATURALES
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Evaluación de aditivos dietarios sobre la morfología yeyunal en explantes porcinos desafiados con Lawsonia intracellularisMozo, JoaquínMartínez, GuadalupeDecundo, Julieta MaríaEguia, Valeria RaquelDieguez, Susana NellySoraci, Alejandro LuisPérez, Denisa SoledadLAWSONIA INTRACELLULARISADITIVOS NATURALESEXPLANTESINTESTINOhttps://purl.org/becyt/ford/4.3https://purl.org/becyt/ford/4Lawsonia intracellularis es una bacteria Gram negativa intracelular obligada, causante de la enteropatía proliferativa porcina, una patología de alta prevalencia en sistemas intensivos de producción porcina. Esta enfermedad afecta principalmente a cerdos en crecimiento y finalización, provocando lesiones hiperplásicas en las criptas intestinales, reducción de la altura de las vellosidades, infiltración inflamatoria y compromiso de la función de barrera epitelial, con impacto negativo sobre la ganancia de peso y conversión alimenticia1,2. En el contexto actual, en el que se busca reducir el uso de antimicrobianos como estrategia frente a la resistencia antimicrobiana, resulta fundamental explorar aditivos nutricionales con propiedades inmunomoduladoras, antiinflamatorias o protectoras de la mucosa intestinal. Entre ellos, la inulina (IN), un fructano fermentable que estimula el crecimiento de bacterias beneficiosas y la producción de ácidos grasos de cadena corta, los aceites esenciales (AE) de Lippia origanoides y Eugenia caryophyllata, reconocidos por su actividad antimicrobiana y antioxidante, y el humato de sodio (HS), capaz de formar una película protectora sobre la superficie epitelial limitando la interacción patógeno-huésped, se presentan como alternativas prometedoras.El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de dichos aditivos, individualmente o combinados, sobre explantes yeyunales porcinos desafiados ex vivo con L. intracellularis. Se utilizaron explantes de 1,3 cm² provenientes de 10 lechones destetados alimentados con dieta basal sin aditivos. Los tejidos fueron montados sobre esponjas estériles con las vellosidades orientadas hacia arriba e incubados durante 24 h (n=4) en medio de cultivo bajo distintas condiciones experimentales: control doble negativo (medio solo), aditivos solos (IN; AE-HS; IN+AE-HS), control positivo con L. intracellularis (LAW) y tratamientos con LAW más cada uno de los aditivos. Posteriormente, se realizaron tinciones con hematoxilina-eosina (H&E) y ácido periódico de Schiff (PAS) para analizar digitalmente parámetros histomorfológicos: altura y ancho de vellosidades (Vh, Vw), profundidad y ancho de criptas (Cd, Cw), área de absorción intestinal (AAI), relación Vh/Cd y número de células caliciformes (Cc).El análisis estadístico se realizó mediante la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis seguida del test de Dunn (α=0,05) con software RStudio (versión 4.5.0). Los resultados se muestran en la tabla 1. No se observaron diferencias significativas para AAI (p=0,24) ni Cc (p=0,33), mientras que sí se detectó un efecto significativo para la variable Vh/Cd (p=0,01). La exposición a LAW redujo significativamente esta relación (1,83 ± 0,47) en comparación con el control (2,61 ± 0,58), lo que evidencia atrofia vellosa severa, consistente con lo reportado en modelos experimentales de infección por esta bacteria1. La suplementación con IN sola incrementó significativamente la relación Vh/Cd respecto al control (3,83 ± 0,84 vs. 2,61 ± 0,58), sugiriendo un posible efecto trófico sobre las vellosidades yeyunales. Sin embargo, en los explantes desafiados con LAW, los aditivos IN (1,85 ± 0,16), AE-HS (1,85 ± 0,19) y la combinación IN+AE-HS (1,88 ± 0,34) no lograron revertir el daño inducido por la bacteria, aunque mostraron una tendencia a valores levemente superiores respecto al grupo LAW solo (1,83 ± 0,47).Estos resultados sugieren que, si bien los aditivos en estudio presentan potencial para mejorar la morfología intestinal en condiciones basales, su efecto protector frente a la infección aguda por L. intracellularis parece limitado en este modelo ex vivo. Es posible que el tiempo de exposición (24 h) no haya sido suficiente para observar efectos inmunomoduladores sostenidos, o que se requiera una combinación con otros compuestos de acción sinérgica. Además, la naturaleza intracelular de L. intracellularis implica que los mecanismos patogénicos no se limitan a una acción local en la superficie epitelial, sino que comprometen vías intracelulares relacionadas con la proliferación celular, inflamación y alteración del ciclo celular. Esto podría explicar la falta de eficacia de compuestos que actúan predominantemente sobre la microbiota o la superficie epitelial. Adicionalmente, debe considerarse que la infección con L. intracellularis induce una respuesta proliferativa celular compleja, lo cual podría dificultar la reversión del daño estructural mediante aditivos de acción principalmente prebiótica o antimicrobiana indirecta.Cabe destacar que, si bien los explantes intestinales no reproducen completamente la complejidad del sistema inmune in vivo, estudios previos han demostrado que este modelo permite detectar respuestas inflamatorias e inmunitarias locales ante el desafío con L. intracellularis3. Por lo tanto, la falta de reversión del daño morfológico observada en este estudio no se atribuye a una ausencia total de respuesta inmune en los explantes, sino posiblemente a la intensidad del daño inducido por la bacteria o a la insuficiencia de los aditivos para modular eficazmente esta respuesta en condiciones agudas.En conclusión, aunque IN mostró un efecto trófico significativo en ausencia del patógeno, los resultados ex vivo no demostraron un efecto protector robusto frente al daño morfológico inducido por L. intracellularis. Estudios in vivo de mayor duración y con evaluación funcional adicional (como expresión génica o integridad de la barrera intestinal) serán necesarios para determinar el verdadero potencial de estos aditivos como herramientas no antibióticas frente a esta enteropatía de importancia productiva.Fil: Mozo, Joaquín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencia Veterinarias. Departamento de Fisiopatología. Laboratorio de Toxicología; ArgentinaFil: Martínez, Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Decundo, Julieta María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Eguia, Valeria Raquel. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencia Veterinarias. Departamento de Fisiopatología. Laboratorio de Toxicología; ArgentinaFil: Dieguez, Susana Nelly. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Soraci, Alejandro Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Pérez, Denisa Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaXXV Jornada de divulgación Técnico - Científica de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional de RosarioRosarioArgentinaUniversidad Nacional de Rosario. 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Entre ellos, la inulina (IN), un fructano fermentable que estimula el crecimiento de bacterias beneficiosas y la producción de ácidos grasos de cadena corta, los aceites esenciales (AE) de Lippia origanoides y Eugenia caryophyllata, reconocidos por su actividad antimicrobiana y antioxidante, y el humato de sodio (HS), capaz de formar una película protectora sobre la superficie epitelial limitando la interacción patógeno-huésped, se presentan como alternativas prometedoras.El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de dichos aditivos, individualmente o combinados, sobre explantes yeyunales porcinos desafiados ex vivo con L. intracellularis. Se utilizaron explantes de 1,3 cm² provenientes de 10 lechones destetados alimentados con dieta basal sin aditivos. Los tejidos fueron montados sobre esponjas estériles con las vellosidades orientadas hacia arriba e incubados durante 24 h (n=4) en medio de cultivo bajo distintas condiciones experimentales: control doble negativo (medio solo), aditivos solos (IN; AE-HS; IN+AE-HS), control positivo con L. intracellularis (LAW) y tratamientos con LAW más cada uno de los aditivos. Posteriormente, se realizaron tinciones con hematoxilina-eosina (H&E) y ácido periódico de Schiff (PAS) para analizar digitalmente parámetros histomorfológicos: altura y ancho de vellosidades (Vh, Vw), profundidad y ancho de criptas (Cd, Cw), área de absorción intestinal (AAI), relación Vh/Cd y número de células caliciformes (Cc).El análisis estadístico se realizó mediante la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis seguida del test de Dunn (α=0,05) con software RStudio (versión 4.5.0). Los resultados se muestran en la tabla 1. No se observaron diferencias significativas para AAI (p=0,24) ni Cc (p=0,33), mientras que sí se detectó un efecto significativo para la variable Vh/Cd (p=0,01). La exposición a LAW redujo significativamente esta relación (1,83 ± 0,47) en comparación con el control (2,61 ± 0,58), lo que evidencia atrofia vellosa severa, consistente con lo reportado en modelos experimentales de infección por esta bacteria1. La suplementación con IN sola incrementó significativamente la relación Vh/Cd respecto al control (3,83 ± 0,84 vs. 2,61 ± 0,58), sugiriendo un posible efecto trófico sobre las vellosidades yeyunales. Sin embargo, en los explantes desafiados con LAW, los aditivos IN (1,85 ± 0,16), AE-HS (1,85 ± 0,19) y la combinación IN+AE-HS (1,88 ± 0,34) no lograron revertir el daño inducido por la bacteria, aunque mostraron una tendencia a valores levemente superiores respecto al grupo LAW solo (1,83 ± 0,47).Estos resultados sugieren que, si bien los aditivos en estudio presentan potencial para mejorar la morfología intestinal en condiciones basales, su efecto protector frente a la infección aguda por L. intracellularis parece limitado en este modelo ex vivo. Es posible que el tiempo de exposición (24 h) no haya sido suficiente para observar efectos inmunomoduladores sostenidos, o que se requiera una combinación con otros compuestos de acción sinérgica. Además, la naturaleza intracelular de L. intracellularis implica que los mecanismos patogénicos no se limitan a una acción local en la superficie epitelial, sino que comprometen vías intracelulares relacionadas con la proliferación celular, inflamación y alteración del ciclo celular. Esto podría explicar la falta de eficacia de compuestos que actúan predominantemente sobre la microbiota o la superficie epitelial. Adicionalmente, debe considerarse que la infección con L. intracellularis induce una respuesta proliferativa celular compleja, lo cual podría dificultar la reversión del daño estructural mediante aditivos de acción principalmente prebiótica o antimicrobiana indirecta.Cabe destacar que, si bien los explantes intestinales no reproducen completamente la complejidad del sistema inmune in vivo, estudios previos han demostrado que este modelo permite detectar respuestas inflamatorias e inmunitarias locales ante el desafío con L. intracellularis3. Por lo tanto, la falta de reversión del daño morfológico observada en este estudio no se atribuye a una ausencia total de respuesta inmune en los explantes, sino posiblemente a la intensidad del daño inducido por la bacteria o a la insuficiencia de los aditivos para modular eficazmente esta respuesta en condiciones agudas.En conclusión, aunque IN mostró un efecto trófico significativo en ausencia del patógeno, los resultados ex vivo no demostraron un efecto protector robusto frente al daño morfológico inducido por L. intracellularis. Estudios in vivo de mayor duración y con evaluación funcional adicional (como expresión génica o integridad de la barrera intestinal) serán necesarios para determinar el verdadero potencial de estos aditivos como herramientas no antibióticas frente a esta enteropatía de importancia productiva. Fil: Mozo, Joaquín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencia Veterinarias. Departamento de Fisiopatología. Laboratorio de Toxicología; Argentina Fil: Martínez, Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Decundo, Julieta María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Eguia, Valeria Raquel. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencia Veterinarias. Departamento de Fisiopatología. Laboratorio de Toxicología; Argentina Fil: Dieguez, Susana Nelly. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Soraci, Alejandro Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Pérez, Denisa Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. 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Lawsonia intracellularis es una bacteria Gram negativa intracelular obligada, causante de la enteropatía proliferativa porcina, una patología de alta prevalencia en sistemas intensivos de producción porcina. Esta enfermedad afecta principalmente a cerdos en crecimiento y finalización, provocando lesiones hiperplásicas en las criptas intestinales, reducción de la altura de las vellosidades, infiltración inflamatoria y compromiso de la función de barrera epitelial, con impacto negativo sobre la ganancia de peso y conversión alimenticia1,2. En el contexto actual, en el que se busca reducir el uso de antimicrobianos como estrategia frente a la resistencia antimicrobiana, resulta fundamental explorar aditivos nutricionales con propiedades inmunomoduladoras, antiinflamatorias o protectoras de la mucosa intestinal. Entre ellos, la inulina (IN), un fructano fermentable que estimula el crecimiento de bacterias beneficiosas y la producción de ácidos grasos de cadena corta, los aceites esenciales (AE) de Lippia origanoides y Eugenia caryophyllata, reconocidos por su actividad antimicrobiana y antioxidante, y el humato de sodio (HS), capaz de formar una película protectora sobre la superficie epitelial limitando la interacción patógeno-huésped, se presentan como alternativas prometedoras.El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de dichos aditivos, individualmente o combinados, sobre explantes yeyunales porcinos desafiados ex vivo con L. intracellularis. Se utilizaron explantes de 1,3 cm² provenientes de 10 lechones destetados alimentados con dieta basal sin aditivos. Los tejidos fueron montados sobre esponjas estériles con las vellosidades orientadas hacia arriba e incubados durante 24 h (n=4) en medio de cultivo bajo distintas condiciones experimentales: control doble negativo (medio solo), aditivos solos (IN; AE-HS; IN+AE-HS), control positivo con L. intracellularis (LAW) y tratamientos con LAW más cada uno de los aditivos. Posteriormente, se realizaron tinciones con hematoxilina-eosina (H&E) y ácido periódico de Schiff (PAS) para analizar digitalmente parámetros histomorfológicos: altura y ancho de vellosidades (Vh, Vw), profundidad y ancho de criptas (Cd, Cw), área de absorción intestinal (AAI), relación Vh/Cd y número de células caliciformes (Cc).El análisis estadístico se realizó mediante la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis seguida del test de Dunn (α=0,05) con software RStudio (versión 4.5.0). Los resultados se muestran en la tabla 1. No se observaron diferencias significativas para AAI (p=0,24) ni Cc (p=0,33), mientras que sí se detectó un efecto significativo para la variable Vh/Cd (p=0,01). La exposición a LAW redujo significativamente esta relación (1,83 ± 0,47) en comparación con el control (2,61 ± 0,58), lo que evidencia atrofia vellosa severa, consistente con lo reportado en modelos experimentales de infección por esta bacteria1. La suplementación con IN sola incrementó significativamente la relación Vh/Cd respecto al control (3,83 ± 0,84 vs. 2,61 ± 0,58), sugiriendo un posible efecto trófico sobre las vellosidades yeyunales. Sin embargo, en los explantes desafiados con LAW, los aditivos IN (1,85 ± 0,16), AE-HS (1,85 ± 0,19) y la combinación IN+AE-HS (1,88 ± 0,34) no lograron revertir el daño inducido por la bacteria, aunque mostraron una tendencia a valores levemente superiores respecto al grupo LAW solo (1,83 ± 0,47).Estos resultados sugieren que, si bien los aditivos en estudio presentan potencial para mejorar la morfología intestinal en condiciones basales, su efecto protector frente a la infección aguda por L. intracellularis parece limitado en este modelo ex vivo. Es posible que el tiempo de exposición (24 h) no haya sido suficiente para observar efectos inmunomoduladores sostenidos, o que se requiera una combinación con otros compuestos de acción sinérgica. Además, la naturaleza intracelular de L. intracellularis implica que los mecanismos patogénicos no se limitan a una acción local en la superficie epitelial, sino que comprometen vías intracelulares relacionadas con la proliferación celular, inflamación y alteración del ciclo celular. Esto podría explicar la falta de eficacia de compuestos que actúan predominantemente sobre la microbiota o la superficie epitelial. Adicionalmente, debe considerarse que la infección con L. intracellularis induce una respuesta proliferativa celular compleja, lo cual podría dificultar la reversión del daño estructural mediante aditivos de acción principalmente prebiótica o antimicrobiana indirecta.Cabe destacar que, si bien los explantes intestinales no reproducen completamente la complejidad del sistema inmune in vivo, estudios previos han demostrado que este modelo permite detectar respuestas inflamatorias e inmunitarias locales ante el desafío con L. intracellularis3. Por lo tanto, la falta de reversión del daño morfológico observada en este estudio no se atribuye a una ausencia total de respuesta inmune en los explantes, sino posiblemente a la intensidad del daño inducido por la bacteria o a la insuficiencia de los aditivos para modular eficazmente esta respuesta en condiciones agudas.En conclusión, aunque IN mostró un efecto trófico significativo en ausencia del patógeno, los resultados ex vivo no demostraron un efecto protector robusto frente al daño morfológico inducido por L. intracellularis. Estudios in vivo de mayor duración y con evaluación funcional adicional (como expresión génica o integridad de la barrera intestinal) serán necesarios para determinar el verdadero potencial de estos aditivos como herramientas no antibióticas frente a esta enteropatía de importancia productiva. |
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