Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenada

Autores
Reyes, Maria Belen
Año de publicación
2025
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Fil: Reyes, Maria Belen. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.
Fil: Zilli, Alex Leonel. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.
Fil: Acuña, Carlos Alberto. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.
Paspalum notatum es una especie megatérmica, rizomatosa y perenne, nativa del continente americano y particularmente predominante en campos de pastoreo del sur de Brasil, Paraguay, Uruguay y nordeste de Argentina. Es una forrajera adaptada al clima subtropical, a suelos pobres y sistemas de escaso manejo del pastoreo. La apomixis es un modo de reproducción asexual a partir de semillas, donde la progenie de una planta representa copias clonales de la planta. Sin embargo, las especies apomícticas mantienen ciertos niveles de reproducción sexual. Trabajos previos han sugerido que las especies apomícticas exhiben mayores niveles de reproducción sexual ante situaciones de estrés, como un mecanismo para generar nueva diversidad y sobrevivir a dichos fenómenos, mientras que en ambientes favorables estas especies priorizan la reproducción asexual de modo de reproducir en mayor medida a individuos más adaptados al medio.El mejoramiento de especies apomícticas mediante hibridación se realiza a partir de la obtención de híbridos superiores, cuyas características son fijadas a través de sucesivos ciclos de multiplicación y cultivo por su modo de reproducción asexual. Sin embargo, se han reportado variaciones por causas ambientales en los niveles de expresividad de la apomixis. La expresividad variable de la apomixis, tanto a nivel de genotipo como ambiental, representa un problema para la liberación de futuros cultivares, debido a que su homogeneidad genética podría verse comprometida en las sucesivas generaciones, por lo que es fundamental determinar la estabilidad genética de estas líneas previas a su liberación al mercado.Los objetivos del presente trabajo fueron: I) evaluar la expresividad de la apomixis de líneas avanzadas de P. notatum a partir de pruebas de progenie asistidas por marcadores moleculares, y II)​determinar el efecto de la fertilización nitrogenada sobre la expresividad de la apomixis de líneas avanzadas de P. notatum.El material vegetal estuvo constituido por 5 líneas apomícticas avanzadas de origen híbrido de P. notatum, las cuales fueron seleccionadas en base a su destacada aptitud forrajera. Se incluyó como controles a los cultivares apomícticos Boyero-UNNE y Argentine, este último es un material selecto del USDA (EEUU), obtenido a partir de una variante natural, siendo el cultivar tetraploide más cultivado en el sudeste de Estados Unidos. Las 5 líneas apomícticas y los controles fueron clonados en forma vegetativa para obtener 6 réplicas idénticas para cada una de ellas. Sobre estas plantas se evaluó la expresión de la apomixis bajo 2 niveles de fertilización nitrogenada (0 y 300 KgN/ha). El ensayo estuvo instalado en el campus de la Facultad de Ciencias Agrarias (UNNE) siguiendo un marco de plantación de 1 x 1 m bajo un diseño de factores anidados con 3 repeticiones. El suelo posee 500 ppm de N total por lo que es considerado pobre en este nutriente. Las inflorescencias fueron cosechadas 30 días luego de su antesis, secadas y trilladas manualmente. Se realizó la extracción de ADN en 14 plántulas (progenie) de cada repetición. La determinación de la homogeneidad de las progenies (expresividad de la apomixis de la planta madre) se realizó a partir del uso de marcadores moleculares del tipo inter-simple-sequence-repeat (ISSR), utilizando primers que resultaron altamente polimórficos para la especie en trabajos previos. La separación de los productos de amplificación se realizó por medio de electroforesis en geles de agarosa al 2%, teñidos con Gel-Green, visualizados con luz azul y foto-documentados. Aquellos individuos que exhiben perfiles moleculares idénticos a la planta madre son considerados de origen apomíctico, mientras que aquellos que presentan perfiles diferentes son considerados de origen sexual. A partir de ello se determinó el porcentaje de expresividad de la apomixis de cada planta madre para cada nivel de fertilización nitrogenada. El análisis de los datos se realizó utilizando el software Info-Gen. Debido a que los datos no se ajustan a una distribución normal, se utilizó un análisis de varianza no paramétrica a partir de una prueba de Kruskal-Wallis. Hasta la fecha se han analizado 2 primers de ISSR, 1 en todos los genotipos y el otro en 5 de los 7. Se logró registrar entre 2 y 3 bandas (amplicones) por primer, analizando entre 2 y 6 bandas totales para cada genotipo. A partir de los dendrogramas de distancias genéticas de Jaccard (1-S) se logró determinar el grado de homogeneidad de las progenies (expresividad de la apomixis), registrando la proporción de individuos que amplificaban un patrón de bandas idéntico a la planta madre, sobre el total de individuos de la progenie. Aquellos individuos de la progenie con una distancia genética mayor a 0,1 fueron considerados productos de reproducción sexual. En la tabla 2 se puede ver que la fertilización nitrogenada no produjo cambios significativos en los niveles de expresividad de la apomixis (81,1 vs 77,4% para 0 y 300 KgN/ha respectivamente). Se observó una interacción genotipo*nitrógeno significativa, debido a que a dosis altas de N los genotipos no difieren entre sí, mientras que en ausencia de fertilización la línea H44 fue superior a L37 y J21, mientras que la línea K14 y los cv Argentine y Boyero no difirieron significativamente el resto. No tenemos bandas registradas en ninguno de los primers evaluados para la línea J7 en el tratamiento 0 KgN/ha, por lo que no contamos con datos de expresividad. En conclusión, la fertilización nitrogenada no produjo cambios significativos en los niveles de expresividad de la apomixis. Las líneas y cultivares evaluados mostraron diferencias en los niveles de expresividad de la apomixis para el tratamiento sin fertilización, mientras que a niveles altos de fertilización no se observan diferencias para esta variable. Resta analizar un mayor número de marcadores para dar mayor robustez a los resultados.
Materia
Líneas
Apomixis
Nitrogeno
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Repositorio
Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)
Institución
Universidad Nacional del Nordeste
OAI Identificador
oai:repositorio.unne.edu.ar:123456789/60648

id RIUNNE_1a5b327819e0a74bec578e75c6611ca4
oai_identifier_str oai:repositorio.unne.edu.ar:123456789/60648
network_acronym_str RIUNNE
repository_id_str 4871
network_name_str Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)
spelling Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenadaReyes, Maria BelenLíneasApomixisNitrogenoFil: Reyes, Maria Belen. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Fil: Zilli, Alex Leonel. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Fil: Acuña, Carlos Alberto. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Paspalum notatum es una especie megatérmica, rizomatosa y perenne, nativa del continente americano y particularmente predominante en campos de pastoreo del sur de Brasil, Paraguay, Uruguay y nordeste de Argentina. Es una forrajera adaptada al clima subtropical, a suelos pobres y sistemas de escaso manejo del pastoreo. La apomixis es un modo de reproducción asexual a partir de semillas, donde la progenie de una planta representa copias clonales de la planta. Sin embargo, las especies apomícticas mantienen ciertos niveles de reproducción sexual. Trabajos previos han sugerido que las especies apomícticas exhiben mayores niveles de reproducción sexual ante situaciones de estrés, como un mecanismo para generar nueva diversidad y sobrevivir a dichos fenómenos, mientras que en ambientes favorables estas especies priorizan la reproducción asexual de modo de reproducir en mayor medida a individuos más adaptados al medio.El mejoramiento de especies apomícticas mediante hibridación se realiza a partir de la obtención de híbridos superiores, cuyas características son fijadas a través de sucesivos ciclos de multiplicación y cultivo por su modo de reproducción asexual. Sin embargo, se han reportado variaciones por causas ambientales en los niveles de expresividad de la apomixis. La expresividad variable de la apomixis, tanto a nivel de genotipo como ambiental, representa un problema para la liberación de futuros cultivares, debido a que su homogeneidad genética podría verse comprometida en las sucesivas generaciones, por lo que es fundamental determinar la estabilidad genética de estas líneas previas a su liberación al mercado.Los objetivos del presente trabajo fueron: I) evaluar la expresividad de la apomixis de líneas avanzadas de P. notatum a partir de pruebas de progenie asistidas por marcadores moleculares, y II)​determinar el efecto de la fertilización nitrogenada sobre la expresividad de la apomixis de líneas avanzadas de P. notatum.El material vegetal estuvo constituido por 5 líneas apomícticas avanzadas de origen híbrido de P. notatum, las cuales fueron seleccionadas en base a su destacada aptitud forrajera. Se incluyó como controles a los cultivares apomícticos Boyero-UNNE y Argentine, este último es un material selecto del USDA (EEUU), obtenido a partir de una variante natural, siendo el cultivar tetraploide más cultivado en el sudeste de Estados Unidos. Las 5 líneas apomícticas y los controles fueron clonados en forma vegetativa para obtener 6 réplicas idénticas para cada una de ellas. Sobre estas plantas se evaluó la expresión de la apomixis bajo 2 niveles de fertilización nitrogenada (0 y 300 KgN/ha). El ensayo estuvo instalado en el campus de la Facultad de Ciencias Agrarias (UNNE) siguiendo un marco de plantación de 1 x 1 m bajo un diseño de factores anidados con 3 repeticiones. El suelo posee 500 ppm de N total por lo que es considerado pobre en este nutriente. Las inflorescencias fueron cosechadas 30 días luego de su antesis, secadas y trilladas manualmente. Se realizó la extracción de ADN en 14 plántulas (progenie) de cada repetición. La determinación de la homogeneidad de las progenies (expresividad de la apomixis de la planta madre) se realizó a partir del uso de marcadores moleculares del tipo inter-simple-sequence-repeat (ISSR), utilizando primers que resultaron altamente polimórficos para la especie en trabajos previos. La separación de los productos de amplificación se realizó por medio de electroforesis en geles de agarosa al 2%, teñidos con Gel-Green, visualizados con luz azul y foto-documentados. Aquellos individuos que exhiben perfiles moleculares idénticos a la planta madre son considerados de origen apomíctico, mientras que aquellos que presentan perfiles diferentes son considerados de origen sexual. A partir de ello se determinó el porcentaje de expresividad de la apomixis de cada planta madre para cada nivel de fertilización nitrogenada. El análisis de los datos se realizó utilizando el software Info-Gen. Debido a que los datos no se ajustan a una distribución normal, se utilizó un análisis de varianza no paramétrica a partir de una prueba de Kruskal-Wallis. Hasta la fecha se han analizado 2 primers de ISSR, 1 en todos los genotipos y el otro en 5 de los 7. Se logró registrar entre 2 y 3 bandas (amplicones) por primer, analizando entre 2 y 6 bandas totales para cada genotipo. A partir de los dendrogramas de distancias genéticas de Jaccard (1-S) se logró determinar el grado de homogeneidad de las progenies (expresividad de la apomixis), registrando la proporción de individuos que amplificaban un patrón de bandas idéntico a la planta madre, sobre el total de individuos de la progenie. Aquellos individuos de la progenie con una distancia genética mayor a 0,1 fueron considerados productos de reproducción sexual. En la tabla 2 se puede ver que la fertilización nitrogenada no produjo cambios significativos en los niveles de expresividad de la apomixis (81,1 vs 77,4% para 0 y 300 KgN/ha respectivamente). Se observó una interacción genotipo*nitrógeno significativa, debido a que a dosis altas de N los genotipos no difieren entre sí, mientras que en ausencia de fertilización la línea H44 fue superior a L37 y J21, mientras que la línea K14 y los cv Argentine y Boyero no difirieron significativamente el resto. No tenemos bandas registradas en ninguno de los primers evaluados para la línea J7 en el tratamiento 0 KgN/ha, por lo que no contamos con datos de expresividad. En conclusión, la fertilización nitrogenada no produjo cambios significativos en los niveles de expresividad de la apomixis. Las líneas y cultivares evaluados mostraron diferencias en los niveles de expresividad de la apomixis para el tratamiento sin fertilización, mientras que a niveles altos de fertilización no se observan diferencias para esta variable. Resta analizar un mayor número de marcadores para dar mayor robustez a los resultados.Universidad Nacional del Nordeste. Secretaría General de Ciencia y TécnicaZilli, Alex LeonelAcuña, Carlos Alberto2025-06-11info:eu-repo/semantics/conferenceObjectinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_5794info:ar-repo/semantics/documentoDeConferenciaapplication/pdfp. 1-2application/pdfReyes, Maria Belen, 2025. Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenada. En: XXX Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas. Resistencia: Universidad Nacional del Nordeste. Secretaría General de Ciencia y Técnica, p. 1-2.https://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/60648spaUNNE/PI/20A002/AR. Corrientes/Poliploidía, reproducción y diversidad en el género Paspalum L.info:eu-repo/semantics/openAccesshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Argentinareponame:Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)instname:Universidad Nacional del Nordeste2026-10-01T11:59:16Zoai:repositorio.unne.edu.ar:123456789/60648instacron:UNNEInstitucionalhttp://repositorio.unne.edu.ar/Universidad públicaNo correspondehttp://repositorio.unne.edu.ar/oaiososa@bib.unne.edu.ar;sergio.alegria@unne.edu.arArgentinaNo correspondeNo correspondeNo correspondeopendoar:48712026-10-01 11:59:17.07Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE) - Universidad Nacional del Nordestefalse
dc.title.none.fl_str_mv Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenada
title Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenada
spellingShingle Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenada
Reyes, Maria Belen
Líneas
Apomixis
Nitrogeno
title_short Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenada
title_full Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenada
title_fullStr Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenada
title_full_unstemmed Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenada
title_sort Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenada
dc.creator.none.fl_str_mv Reyes, Maria Belen
author Reyes, Maria Belen
author_facet Reyes, Maria Belen
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Zilli, Alex Leonel
Acuña, Carlos Alberto
dc.subject.none.fl_str_mv Líneas
Apomixis
Nitrogeno
topic Líneas
Apomixis
Nitrogeno
dc.description.none.fl_txt_mv Fil: Reyes, Maria Belen. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.
Fil: Zilli, Alex Leonel. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.
Fil: Acuña, Carlos Alberto. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.
Paspalum notatum es una especie megatérmica, rizomatosa y perenne, nativa del continente americano y particularmente predominante en campos de pastoreo del sur de Brasil, Paraguay, Uruguay y nordeste de Argentina. Es una forrajera adaptada al clima subtropical, a suelos pobres y sistemas de escaso manejo del pastoreo. La apomixis es un modo de reproducción asexual a partir de semillas, donde la progenie de una planta representa copias clonales de la planta. Sin embargo, las especies apomícticas mantienen ciertos niveles de reproducción sexual. Trabajos previos han sugerido que las especies apomícticas exhiben mayores niveles de reproducción sexual ante situaciones de estrés, como un mecanismo para generar nueva diversidad y sobrevivir a dichos fenómenos, mientras que en ambientes favorables estas especies priorizan la reproducción asexual de modo de reproducir en mayor medida a individuos más adaptados al medio.El mejoramiento de especies apomícticas mediante hibridación se realiza a partir de la obtención de híbridos superiores, cuyas características son fijadas a través de sucesivos ciclos de multiplicación y cultivo por su modo de reproducción asexual. Sin embargo, se han reportado variaciones por causas ambientales en los niveles de expresividad de la apomixis. La expresividad variable de la apomixis, tanto a nivel de genotipo como ambiental, representa un problema para la liberación de futuros cultivares, debido a que su homogeneidad genética podría verse comprometida en las sucesivas generaciones, por lo que es fundamental determinar la estabilidad genética de estas líneas previas a su liberación al mercado.Los objetivos del presente trabajo fueron: I) evaluar la expresividad de la apomixis de líneas avanzadas de P. notatum a partir de pruebas de progenie asistidas por marcadores moleculares, y II)​determinar el efecto de la fertilización nitrogenada sobre la expresividad de la apomixis de líneas avanzadas de P. notatum.El material vegetal estuvo constituido por 5 líneas apomícticas avanzadas de origen híbrido de P. notatum, las cuales fueron seleccionadas en base a su destacada aptitud forrajera. Se incluyó como controles a los cultivares apomícticos Boyero-UNNE y Argentine, este último es un material selecto del USDA (EEUU), obtenido a partir de una variante natural, siendo el cultivar tetraploide más cultivado en el sudeste de Estados Unidos. Las 5 líneas apomícticas y los controles fueron clonados en forma vegetativa para obtener 6 réplicas idénticas para cada una de ellas. Sobre estas plantas se evaluó la expresión de la apomixis bajo 2 niveles de fertilización nitrogenada (0 y 300 KgN/ha). El ensayo estuvo instalado en el campus de la Facultad de Ciencias Agrarias (UNNE) siguiendo un marco de plantación de 1 x 1 m bajo un diseño de factores anidados con 3 repeticiones. El suelo posee 500 ppm de N total por lo que es considerado pobre en este nutriente. Las inflorescencias fueron cosechadas 30 días luego de su antesis, secadas y trilladas manualmente. Se realizó la extracción de ADN en 14 plántulas (progenie) de cada repetición. La determinación de la homogeneidad de las progenies (expresividad de la apomixis de la planta madre) se realizó a partir del uso de marcadores moleculares del tipo inter-simple-sequence-repeat (ISSR), utilizando primers que resultaron altamente polimórficos para la especie en trabajos previos. La separación de los productos de amplificación se realizó por medio de electroforesis en geles de agarosa al 2%, teñidos con Gel-Green, visualizados con luz azul y foto-documentados. Aquellos individuos que exhiben perfiles moleculares idénticos a la planta madre son considerados de origen apomíctico, mientras que aquellos que presentan perfiles diferentes son considerados de origen sexual. A partir de ello se determinó el porcentaje de expresividad de la apomixis de cada planta madre para cada nivel de fertilización nitrogenada. El análisis de los datos se realizó utilizando el software Info-Gen. Debido a que los datos no se ajustan a una distribución normal, se utilizó un análisis de varianza no paramétrica a partir de una prueba de Kruskal-Wallis. Hasta la fecha se han analizado 2 primers de ISSR, 1 en todos los genotipos y el otro en 5 de los 7. Se logró registrar entre 2 y 3 bandas (amplicones) por primer, analizando entre 2 y 6 bandas totales para cada genotipo. A partir de los dendrogramas de distancias genéticas de Jaccard (1-S) se logró determinar el grado de homogeneidad de las progenies (expresividad de la apomixis), registrando la proporción de individuos que amplificaban un patrón de bandas idéntico a la planta madre, sobre el total de individuos de la progenie. Aquellos individuos de la progenie con una distancia genética mayor a 0,1 fueron considerados productos de reproducción sexual. En la tabla 2 se puede ver que la fertilización nitrogenada no produjo cambios significativos en los niveles de expresividad de la apomixis (81,1 vs 77,4% para 0 y 300 KgN/ha respectivamente). Se observó una interacción genotipo*nitrógeno significativa, debido a que a dosis altas de N los genotipos no difieren entre sí, mientras que en ausencia de fertilización la línea H44 fue superior a L37 y J21, mientras que la línea K14 y los cv Argentine y Boyero no difirieron significativamente el resto. No tenemos bandas registradas en ninguno de los primers evaluados para la línea J7 en el tratamiento 0 KgN/ha, por lo que no contamos con datos de expresividad. En conclusión, la fertilización nitrogenada no produjo cambios significativos en los niveles de expresividad de la apomixis. Las líneas y cultivares evaluados mostraron diferencias en los niveles de expresividad de la apomixis para el tratamiento sin fertilización, mientras que a niveles altos de fertilización no se observan diferencias para esta variable. Resta analizar un mayor número de marcadores para dar mayor robustez a los resultados.
description Fil: Reyes, Maria Belen. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.
publishDate 2025
dc.date.none.fl_str_mv 2025-06-11
dc.type.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/conferenceObject
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
http://purl.org/coar/resource_type/c_5794
info:ar-repo/semantics/documentoDeConferencia
format conferenceObject
status_str publishedVersion
dc.identifier.none.fl_str_mv Reyes, Maria Belen, 2025. Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenada. En: XXX Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas. Resistencia: Universidad Nacional del Nordeste. Secretaría General de Ciencia y Técnica, p. 1-2.
https://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/60648
identifier_str_mv Reyes, Maria Belen, 2025. Expresión de la apomixis en líneas avanzadas de Paspalum notatum con y sin fertilización nitrogenada. En: XXX Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas. Resistencia: Universidad Nacional del Nordeste. Secretaría General de Ciencia y Técnica, p. 1-2.
url https://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/60648
dc.language.none.fl_str_mv spa
language spa
dc.relation.none.fl_str_mv UNNE/PI/20A002/AR. Corrientes/Poliploidía, reproducción y diversidad en el género Paspalum L.
dc.rights.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Argentina
eu_rights_str_mv openAccess
rights_invalid_str_mv http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Argentina
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
p. 1-2
application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidad Nacional del Nordeste. Secretaría General de Ciencia y Técnica
publisher.none.fl_str_mv Universidad Nacional del Nordeste. Secretaría General de Ciencia y Técnica
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)
instname:Universidad Nacional del Nordeste
reponame_str Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)
collection Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)
instname_str Universidad Nacional del Nordeste
repository.name.fl_str_mv Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE) - Universidad Nacional del Nordeste
repository.mail.fl_str_mv ososa@bib.unne.edu.ar;sergio.alegria@unne.edu.ar
_version_ 1877861982964547584
score 12.854657