Gen COI, identidad revelada : Explorando la diversidad del género Sabethes (Diptera: Culicidae) en el Nordeste Argentino

Autores
Filipponi, Juan Manuel
Año de publicación
2025
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Fil: Filipponi, Juan Manuel. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina.
Fil: Stein, Marina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Humanidades; Argentina.
Fil: Oria, Griselda Inés. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina; Argentina.
La taxonomía molecular es una herramienta muy útil que permite la identificación de especímenes dañados, especies crípticas, taxones que carecen de suficientes estudios taxonómicos. Desde hace varios años, la secuencia del gen mitocondrial Citocromo C Oxidasa Subunidad I (COI), es utilizada como un código de barras universal para la identificación de especies de mosquitos. Mosquito Barcoding Initiative, es una de las campañas del proyecto global Barcode of Life, que tiene la finalidad de utilizar un fragmento estandarizado de ~684 pb del gen COI, para identificar especies y contribuir con el descubrimiento de la biodiversidad que aún se desconoce. Actualmente en Argentina 52 (21,31%) especies y diez géneros (47,62%) presentan secuencias de código de barras del total de 244 especies de mosquitos distribuidas en 21 géneros registradas para Argentina. En particular para el género Sabethes registrados en Argentina, solo dos especies cuentan con código de barras, Sabethes (Sabethes) albiprivus y Sabethes (Sabethinus) intermedius. De las 13 especies de este género registradas para Argentina, algunas de ellas son de reconocida importancia sanitaria, tales como, Sabethes (Sabethoides) chloropterus, Sabethes (Peytonulus) identicus. Han sido escasos los aportes recientes en relación a la taxonomía del género, los cuales serían útiles, dado que las claves dicotómicas disponibles para las hembras, se basan en la coloración de escamas y cerdas, pudiendo resultar subjetiva al momento de la identificación. El objetivo general de este trabajo fue contribuir al conocimiento de la sistemática y diversidad del género Sabethes (Diptera: Culicidae) del nordeste argentino. Los objetivos específicos de este estudio fueron (1) Utilizar las secuencias del gen COI para identificar especies del género Sabethes colectadas en el nordeste argentino. (2) Ampliar el listado de especies de mosquitos de Argentina con código de barras genético y que pudieran ser integrados al GenBank y BOLDSystems. Los ejemplares adultos hembra o macho del género Sabethes provenientes de colectas realizadas en Eldorado, Puerto Iguazú y Piñalito, provincia de Misiones y San Cayetano, provincia de Corrientes. La ciudad de Eldorado, pertenece a la región Neotropical, presenta clima subtropical sin estación seca, dónde el tipo de vegetación predominante es la selva, siendo la provincia fitogeográfica de mayor riqueza de especies vegetales del país. La localidad de Puerto Iguazú pertenece a la ecorregión de la selva paranaense, con un clima subtropical. El Parque provincial Piñalito se encuentra en el Departamento de San Pedro al nordeste de la provincia de Misiones. Posee una vegetación mixta con predominio de elementos típicos de la porción sur del Bosque Atlántico como la araucaria. La localidad de San Cayetano está ubicada al noreste de la provincia de Corrientes y su clima es subtropical o mesotermal. Previo al análisis molecular, los especímenes fueron identificados utilizando las claves dicotómicas de Darsie (1985), Lane (1953), y descripciones originales. En algunos casos se contó con las exuvias de larvas de estadío IV y genitalia masculina lo que contribuyó a la identificación morfológica. Los adultos fueron procesados para la extracción de ADN utilizando kits comerciales siguiendo las instrucciones de los fabricantes. La amplificación del gen COI se realizó mediante una PCR convencional bajo condiciones descriptas por Laurito et al., (2022), utilizando los cebadores descriptos por Hebert et al., (2004). Los resultados se visualizaron por medio de un gel de agarosa al 2%. Los amplificados fueron enviados a secuenciar a Macrogen, Inc., Corea del Sur, para confirmar su identidad específica, luego fueron editadas con los softwares Bioedit y Mega11. Para la incorporación de las secuencias en los servidores se utilizaron las herramientas proporcionadas por el GenBank y BOLDSystems. De un total de 34 ejemplares adultos estudiados, se obtuvieron 24 resultados positivos en la detección del gen COI. Catorce de los 24 resultados positivos fueron secuenciados correspondiendo a las siguientes especies: Sabethes aurescens (n=1), Sabethes glaucodaemon (n=2), Sabethes identicus (n=3) y Sabethes undosus (n=8). Nueve de los 12 ejemplares del género Sabethes contaban con su respectiva secuencia de código de barras COI en los dos servidores consultados, lo que confirmó la identificación molecular de las especies: Sabethes undosus (n=8) y Sabethes glaucodaemon (n=1). Dicha identificación fue coincidente con la determinación morfológica. La búsqueda de las secuencias del gen COI correspondiente a la especie Sabethes identicus arrojó resultados coincidentes con Sabethes chloropterus, pero la identificación taxonómica no deja duda de su determinación. Esta discrepancia se explica por la ausencia de registros de códigos de barras para esta especie en los servidores consultados. Las secuencias obtenidas en este estudio representan los primeros registros para nuestro país, y en particular las de Sabethes identicus, para la ciencia. Dichas secuencias fueron incorporadas al Genbank y BOLDSystems. Los códigos de barras de ADN son una herramienta eficiente en la determinación de especies del género Sabethes, identificando con éxito las secuencias analizadas en este trabajo. Los resultados obtenidos en el presente estudio permitieron aumentar de 53 a 56 (21,72% a 22,95%) el número de especies pertenecientes a Culicidae con secuencias de código de barras para Argentina, del total de 244 especies de mosquitos registradas para nuestro país.
Materia
Sabethes
Identificación molecular
COI
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Repositorio
Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)
Institución
Universidad Nacional del Nordeste
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Mosquito Barcoding Initiative, es una de las campañas del proyecto global Barcode of Life, que tiene la finalidad de utilizar un fragmento estandarizado de ~684 pb del gen COI, para identificar especies y contribuir con el descubrimiento de la biodiversidad que aún se desconoce. Actualmente en Argentina 52 (21,31%) especies y diez géneros (47,62%) presentan secuencias de código de barras del total de 244 especies de mosquitos distribuidas en 21 géneros registradas para Argentina. En particular para el género Sabethes registrados en Argentina, solo dos especies cuentan con código de barras, Sabethes (Sabethes) albiprivus y Sabethes (Sabethinus) intermedius. De las 13 especies de este género registradas para Argentina, algunas de ellas son de reconocida importancia sanitaria, tales como, Sabethes (Sabethoides) chloropterus, Sabethes (Peytonulus) identicus. Han sido escasos los aportes recientes en relación a la taxonomía del género, los cuales serían útiles, dado que las claves dicotómicas disponibles para las hembras, se basan en la coloración de escamas y cerdas, pudiendo resultar subjetiva al momento de la identificación. El objetivo general de este trabajo fue contribuir al conocimiento de la sistemática y diversidad del género Sabethes (Diptera: Culicidae) del nordeste argentino. Los objetivos específicos de este estudio fueron (1) Utilizar las secuencias del gen COI para identificar especies del género Sabethes colectadas en el nordeste argentino. (2) Ampliar el listado de especies de mosquitos de Argentina con código de barras genético y que pudieran ser integrados al GenBank y BOLDSystems. Los ejemplares adultos hembra o macho del género Sabethes provenientes de colectas realizadas en Eldorado, Puerto Iguazú y Piñalito, provincia de Misiones y San Cayetano, provincia de Corrientes. La ciudad de Eldorado, pertenece a la región Neotropical, presenta clima subtropical sin estación seca, dónde el tipo de vegetación predominante es la selva, siendo la provincia fitogeográfica de mayor riqueza de especies vegetales del país. La localidad de Puerto Iguazú pertenece a la ecorregión de la selva paranaense, con un clima subtropical. El Parque provincial Piñalito se encuentra en el Departamento de San Pedro al nordeste de la provincia de Misiones. Posee una vegetación mixta con predominio de elementos típicos de la porción sur del Bosque Atlántico como la araucaria. La localidad de San Cayetano está ubicada al noreste de la provincia de Corrientes y su clima es subtropical o mesotermal. Previo al análisis molecular, los especímenes fueron identificados utilizando las claves dicotómicas de Darsie (1985), Lane (1953), y descripciones originales. 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Las secuencias obtenidas en este estudio representan los primeros registros para nuestro país, y en particular las de Sabethes identicus, para la ciencia. Dichas secuencias fueron incorporadas al Genbank y BOLDSystems. Los códigos de barras de ADN son una herramienta eficiente en la determinación de especies del género Sabethes, identificando con éxito las secuencias analizadas en este trabajo. Los resultados obtenidos en el presente estudio permitieron aumentar de 53 a 56 (21,72% a 22,95%) el número de especies pertenecientes a Culicidae con secuencias de código de barras para Argentina, del total de 244 especies de mosquitos registradas para nuestro país.Universidad Nacional del Nordeste. 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La taxonomía molecular es una herramienta muy útil que permite la identificación de especímenes dañados, especies crípticas, taxones que carecen de suficientes estudios taxonómicos. Desde hace varios años, la secuencia del gen mitocondrial Citocromo C Oxidasa Subunidad I (COI), es utilizada como un código de barras universal para la identificación de especies de mosquitos. Mosquito Barcoding Initiative, es una de las campañas del proyecto global Barcode of Life, que tiene la finalidad de utilizar un fragmento estandarizado de ~684 pb del gen COI, para identificar especies y contribuir con el descubrimiento de la biodiversidad que aún se desconoce. Actualmente en Argentina 52 (21,31%) especies y diez géneros (47,62%) presentan secuencias de código de barras del total de 244 especies de mosquitos distribuidas en 21 géneros registradas para Argentina. En particular para el género Sabethes registrados en Argentina, solo dos especies cuentan con código de barras, Sabethes (Sabethes) albiprivus y Sabethes (Sabethinus) intermedius. De las 13 especies de este género registradas para Argentina, algunas de ellas son de reconocida importancia sanitaria, tales como, Sabethes (Sabethoides) chloropterus, Sabethes (Peytonulus) identicus. Han sido escasos los aportes recientes en relación a la taxonomía del género, los cuales serían útiles, dado que las claves dicotómicas disponibles para las hembras, se basan en la coloración de escamas y cerdas, pudiendo resultar subjetiva al momento de la identificación. El objetivo general de este trabajo fue contribuir al conocimiento de la sistemática y diversidad del género Sabethes (Diptera: Culicidae) del nordeste argentino. Los objetivos específicos de este estudio fueron (1) Utilizar las secuencias del gen COI para identificar especies del género Sabethes colectadas en el nordeste argentino. (2) Ampliar el listado de especies de mosquitos de Argentina con código de barras genético y que pudieran ser integrados al GenBank y BOLDSystems. Los ejemplares adultos hembra o macho del género Sabethes provenientes de colectas realizadas en Eldorado, Puerto Iguazú y Piñalito, provincia de Misiones y San Cayetano, provincia de Corrientes. La ciudad de Eldorado, pertenece a la región Neotropical, presenta clima subtropical sin estación seca, dónde el tipo de vegetación predominante es la selva, siendo la provincia fitogeográfica de mayor riqueza de especies vegetales del país. La localidad de Puerto Iguazú pertenece a la ecorregión de la selva paranaense, con un clima subtropical. El Parque provincial Piñalito se encuentra en el Departamento de San Pedro al nordeste de la provincia de Misiones. Posee una vegetación mixta con predominio de elementos típicos de la porción sur del Bosque Atlántico como la araucaria. La localidad de San Cayetano está ubicada al noreste de la provincia de Corrientes y su clima es subtropical o mesotermal. Previo al análisis molecular, los especímenes fueron identificados utilizando las claves dicotómicas de Darsie (1985), Lane (1953), y descripciones originales. En algunos casos se contó con las exuvias de larvas de estadío IV y genitalia masculina lo que contribuyó a la identificación morfológica. Los adultos fueron procesados para la extracción de ADN utilizando kits comerciales siguiendo las instrucciones de los fabricantes. La amplificación del gen COI se realizó mediante una PCR convencional bajo condiciones descriptas por Laurito et al., (2022), utilizando los cebadores descriptos por Hebert et al., (2004). Los resultados se visualizaron por medio de un gel de agarosa al 2%. Los amplificados fueron enviados a secuenciar a Macrogen, Inc., Corea del Sur, para confirmar su identidad específica, luego fueron editadas con los softwares Bioedit y Mega11. Para la incorporación de las secuencias en los servidores se utilizaron las herramientas proporcionadas por el GenBank y BOLDSystems. De un total de 34 ejemplares adultos estudiados, se obtuvieron 24 resultados positivos en la detección del gen COI. Catorce de los 24 resultados positivos fueron secuenciados correspondiendo a las siguientes especies: Sabethes aurescens (n=1), Sabethes glaucodaemon (n=2), Sabethes identicus (n=3) y Sabethes undosus (n=8). Nueve de los 12 ejemplares del género Sabethes contaban con su respectiva secuencia de código de barras COI en los dos servidores consultados, lo que confirmó la identificación molecular de las especies: Sabethes undosus (n=8) y Sabethes glaucodaemon (n=1). Dicha identificación fue coincidente con la determinación morfológica. La búsqueda de las secuencias del gen COI correspondiente a la especie Sabethes identicus arrojó resultados coincidentes con Sabethes chloropterus, pero la identificación taxonómica no deja duda de su determinación. Esta discrepancia se explica por la ausencia de registros de códigos de barras para esta especie en los servidores consultados. Las secuencias obtenidas en este estudio representan los primeros registros para nuestro país, y en particular las de Sabethes identicus, para la ciencia. Dichas secuencias fueron incorporadas al Genbank y BOLDSystems. Los códigos de barras de ADN son una herramienta eficiente en la determinación de especies del género Sabethes, identificando con éxito las secuencias analizadas en este trabajo. Los resultados obtenidos en el presente estudio permitieron aumentar de 53 a 56 (21,72% a 22,95%) el número de especies pertenecientes a Culicidae con secuencias de código de barras para Argentina, del total de 244 especies de mosquitos registradas para nuestro país.
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