Silenciamiento de regiones NOR en hexaploides de Andropogon L. (Poaceae) reveladas por FISH

Autores
Hidalgo, María Irma de las Mercedes; Greizerstein, Eduardo José; Norrmann, Guillermo Alberto
Año de publicación
2022
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Fil: Hidalgo, María Irma de las Mercedes. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.
Fil: Hidalgo, María Irma de las Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentina.
Fil: Greizerstein, Eduardo José. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.
Fil: Greizerstein, Eduardo José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentina.
Fil: Norrmann, Guillermo Alberto. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.
Fil: Norrmann, Guillermo Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentina.
A fin de inferir los procesos de diferenciación genómica ocurridos durante la estabilización de los alopoliploides del género Andropogon: A. barretoi Norrmann & Quarin (2n=6x=60), A. exaratus Hackel (2n=6x=60), A. glaucophyllus Roseng., B.R. Arrill. & Izag. (2n=6x=60) y A. gerardii Vitman (2n=6x=60), en este trabajo se extiendieron los análisis citogenéticos aplicando la técnica de Hibridación In Situ Fluorescente (FISH). La sonda ADN ribosomal utilizada, se corresponde con las secuencias de ADNr pudiendo detectar, además, otras regiones que podrían estar silenciadas o no expresarse, como organizadores nucleolares. Las preparaciones de cromosomas mitóticos se obtuvieron a partir de células meristemáticas de ápices radiculares tratadas en una digestión enzimática (celulasa-pectinasa v/v) en buffer citrato pH 4,8 a 37° C. Se eliminó el cubreobjeto por congelamiento y se conservaron 5° C. Se aplicó la técnica de FISH para revelar el número y localización de los sitios de ADNr, aislándose una secuencia 45S de Triticum aestivum homóloga a la de las especies a analizar. La sonda se marcó con biotina y se detectó con Cy3 (red). Las células se fotografiaron por medio de un microscopio de fluorescencia asistido con cámara digital. En A. barretoi, A. exaratus, A. glaucophyllus y A. gerardii; se detectaron dos loci de ADNr 45S. Estos resultados podrían estar indicando que, por un proceso de anfiplastia, con mecanismo epigenético de metilación, se silenciaron los organizadores nucleolares de una de las dos especies involucradas en la formación del poliploide; al no ser funcionales esas secuencias pudieron perderse no siendo detectadas. El empleo de la técnica de FISH, permitió, por primera vez, el mapeo físico de las regiones de ADNr 45S en estos hexaploides evidenciando cambios cromosómicos estructurales que podrían haber participado o acompañado la evolución de estos poliploides.
Materia
Género andropogon
Técnica de Fish
Hexaploides
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Repositorio
Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)
Institución
Universidad Nacional del Nordeste
OAI Identificador
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A fin de inferir los procesos de diferenciación genómica ocurridos durante la estabilización de los alopoliploides del género Andropogon: A. barretoi Norrmann & Quarin (2n=6x=60), A. exaratus Hackel (2n=6x=60), A. glaucophyllus Roseng., B.R. Arrill. & Izag. (2n=6x=60) y A. gerardii Vitman (2n=6x=60), en este trabajo se extiendieron los análisis citogenéticos aplicando la técnica de Hibridación In Situ Fluorescente (FISH). La sonda ADN ribosomal utilizada, se corresponde con las secuencias de ADNr pudiendo detectar, además, otras regiones que podrían estar silenciadas o no expresarse, como organizadores nucleolares. Las preparaciones de cromosomas mitóticos se obtuvieron a partir de células meristemáticas de ápices radiculares tratadas en una digestión enzimática (celulasa-pectinasa v/v) en buffer citrato pH 4,8 a 37° C. Se eliminó el cubreobjeto por congelamiento y se conservaron 5° C. Se aplicó la técnica de FISH para revelar el número y localización de los sitios de ADNr, aislándose una secuencia 45S de Triticum aestivum homóloga a la de las especies a analizar. La sonda se marcó con biotina y se detectó con Cy3 (red). Las células se fotografiaron por medio de un microscopio de fluorescencia asistido con cámara digital. En A. barretoi, A. exaratus, A. glaucophyllus y A. gerardii; se detectaron dos loci de ADNr 45S. Estos resultados podrían estar indicando que, por un proceso de anfiplastia, con mecanismo epigenético de metilación, se silenciaron los organizadores nucleolares de una de las dos especies involucradas en la formación del poliploide; al no ser funcionales esas secuencias pudieron perderse no siendo detectadas. El empleo de la técnica de FISH, permitió, por primera vez, el mapeo físico de las regiones de ADNr 45S en estos hexaploides evidenciando cambios cromosómicos estructurales que podrían haber participado o acompañado la evolución de estos poliploides.
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