Comparación de la actividad citotóxica de extractos de Neltuma sp. de Salta y Santiago del Estero sobre células gliales

Autores
Cabrera Benitez, Angelica Maria
Año de publicación
2025
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Fil: Cabrera Benitez, Angelica Maria. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.
Fil: Cholich, Luciana Andrea. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.
Fil: Bustillo, Soledad. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas, Naturales y Agrimensura; Argentina.
Las especies del género Neltuma, conocidas como “algarrobos”, son utilizadas como un alimento para los animales. Sin embargo, han sido reportadas intoxicaciones espontáneas en bovinos por consumo crónico de sus vainas, tanto en Brasil como en la provincia de Salta, Argentina. La intoxicación se atribuye a los alcaloides juliprosina y juliprosopina, los cuales afectan al sistema nervioso central. En los últimos años nuevos casos de intoxicaciones han sido comunicadas en la provincia de Santiago del Estero. A partir de ello, se obtuvieron extractos para identificar los componentes tóxicos, evaluar y comparar la actividad citotóxica con extractos de N. flexuosa proveniente de la provincia de Salta. Se elaboraron extractos alcaloidales (EAs) a partir de sus vainas, las que fueron recolectadas en distintas localidades de las provincias de Salta y Santiago del Estero, se identificaron como EA1 (Bobadal), EA2 (Quimilí), EA3 (San Carlos) y EA4 (Cafayate). Se empleó la línea celular C6 (ATCC: CCL-107™) de glioma maligno murino. Las células se mantuvieron en un medio DMEM con 10% de SFB y antibióticos. Posteriormente, fueron expuestas a diferentes concentraciones (5 a 30 μg/mL) por 48 h. La viabilidad celular se cuantificó mediante el método de MTT (Bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol). Las células sin tratamiento, se tomaron como el 100% de la viabilidad celular. La lectura se realizó en un espectrofotómetro a una longitud de onda de 550 nm. Se empleó la inmunocitoquímica para analizar la morfología celular luego de la exposición a la concentración más baja de cada EAs. Todas las células tratadas y no tratadas del cultivo sembradas sobre vidrios, fueron incubadas con el anticuerpo primario anti-GFAP, marcador específico de astrocitos, utilizando una dilución de 1:500. En todos los extractos de Neltuma sp., se identificaron los alcaloides juliprosina (JPS) y juliprosopina (JPSP), hallándose la mayor concentración de ambos alcaloides en EA1. Luego de la incubación de las células con diferentes concentraciones de los EAs se evidenció un efecto citotóxico dosis dependiente en todos los extractos, siendo los extractos EA1 y EA2 significativamente más tóxicos que EA3 y EA4. La diferencia en la disminución de la viabilidad celular fue más evidente en la dosis más alta ensayada (30 μg/mL), siendo de 9±2 % en EA1 y 7±1 % en EA2, con respecto a 59,5 ±7,7 % en EA3 y 59 ± 2,7% en EA4. A partir de la inmunocitoquimica, las células expuestas a EA1 y EA2 exhibieron mayor marcación de GFAP, acortamiento de las prolongaciones y áreas desprovistas de células, estos cambios fueron más evidentes en las células expuestas a EA1. Sin embargo, las células expuestas a EA3 y EA4 no exhibieron cambios en su marcación y alteraciones morfológicas siendo similares a las células controles. En base a estos resultados, adquiere relevancia determinar qué especies de Neltuma se encuentran en la provincia de Santiago del Estero, particularmente en las localidades de Quimilí y Bobadal, debido a su potencial efecto tóxico.
Materia
Algarrobos
Citotoxicidad
Alcaloides piperidínicos
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Repositorio
Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)
Institución
Universidad Nacional del Nordeste
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En los últimos años nuevos casos de intoxicaciones han sido comunicadas en la provincia de Santiago del Estero. A partir de ello, se obtuvieron extractos para identificar los componentes tóxicos, evaluar y comparar la actividad citotóxica con extractos de N. flexuosa proveniente de la provincia de Salta. Se elaboraron extractos alcaloidales (EAs) a partir de sus vainas, las que fueron recolectadas en distintas localidades de las provincias de Salta y Santiago del Estero, se identificaron como EA1 (Bobadal), EA2 (Quimilí), EA3 (San Carlos) y EA4 (Cafayate). Se empleó la línea celular C6 (ATCC: CCL-107™) de glioma maligno murino. Las células se mantuvieron en un medio DMEM con 10% de SFB y antibióticos. Posteriormente, fueron expuestas a diferentes concentraciones (5 a 30 μg/mL) por 48 h. La viabilidad celular se cuantificó mediante el método de MTT (Bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol). 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Las especies del género Neltuma, conocidas como “algarrobos”, son utilizadas como un alimento para los animales. Sin embargo, han sido reportadas intoxicaciones espontáneas en bovinos por consumo crónico de sus vainas, tanto en Brasil como en la provincia de Salta, Argentina. La intoxicación se atribuye a los alcaloides juliprosina y juliprosopina, los cuales afectan al sistema nervioso central. En los últimos años nuevos casos de intoxicaciones han sido comunicadas en la provincia de Santiago del Estero. A partir de ello, se obtuvieron extractos para identificar los componentes tóxicos, evaluar y comparar la actividad citotóxica con extractos de N. flexuosa proveniente de la provincia de Salta. Se elaboraron extractos alcaloidales (EAs) a partir de sus vainas, las que fueron recolectadas en distintas localidades de las provincias de Salta y Santiago del Estero, se identificaron como EA1 (Bobadal), EA2 (Quimilí), EA3 (San Carlos) y EA4 (Cafayate). Se empleó la línea celular C6 (ATCC: CCL-107™) de glioma maligno murino. Las células se mantuvieron en un medio DMEM con 10% de SFB y antibióticos. Posteriormente, fueron expuestas a diferentes concentraciones (5 a 30 μg/mL) por 48 h. La viabilidad celular se cuantificó mediante el método de MTT (Bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol). Las células sin tratamiento, se tomaron como el 100% de la viabilidad celular. La lectura se realizó en un espectrofotómetro a una longitud de onda de 550 nm. Se empleó la inmunocitoquímica para analizar la morfología celular luego de la exposición a la concentración más baja de cada EAs. Todas las células tratadas y no tratadas del cultivo sembradas sobre vidrios, fueron incubadas con el anticuerpo primario anti-GFAP, marcador específico de astrocitos, utilizando una dilución de 1:500. En todos los extractos de Neltuma sp., se identificaron los alcaloides juliprosina (JPS) y juliprosopina (JPSP), hallándose la mayor concentración de ambos alcaloides en EA1. Luego de la incubación de las células con diferentes concentraciones de los EAs se evidenció un efecto citotóxico dosis dependiente en todos los extractos, siendo los extractos EA1 y EA2 significativamente más tóxicos que EA3 y EA4. La diferencia en la disminución de la viabilidad celular fue más evidente en la dosis más alta ensayada (30 μg/mL), siendo de 9±2 % en EA1 y 7±1 % en EA2, con respecto a 59,5 ±7,7 % en EA3 y 59 ± 2,7% en EA4. A partir de la inmunocitoquimica, las células expuestas a EA1 y EA2 exhibieron mayor marcación de GFAP, acortamiento de las prolongaciones y áreas desprovistas de células, estos cambios fueron más evidentes en las células expuestas a EA1. Sin embargo, las células expuestas a EA3 y EA4 no exhibieron cambios en su marcación y alteraciones morfológicas siendo similares a las células controles. En base a estos resultados, adquiere relevancia determinar qué especies de Neltuma se encuentran en la provincia de Santiago del Estero, particularmente en las localidades de Quimilí y Bobadal, debido a su potencial efecto tóxico.
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