Evaluación in vitro e in vivo del efecto de silimarina para inhibir la actividad fosfolipásica de venenos de serpientes del nordeste argentino

Autores
Ricciardi Soloaga, Sol Bianca
Año de publicación
2025
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Fil: Ricciardi Soloaga, Sol Bianca. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura; Argentina.
Fil: Gay, Claudia Carolina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura; Argentina; Argentina.
Fil: Fusco, Luciano Sebastian. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura; Argentina; Argentina.
La incidencia de accidentes ofídicos en la Argentina puede superar los 150 casos por 100.000 habitantes por año, siendo las mordeduras del género Bothrops (yararás) las predominantes en un 96,6%, seguido de las de Crotalus (cascabel) con un 2,8%. Actualmente, el único tratamiento eficaz es la administración intravenosa del antiveneno específico que puede acarrear problemas inherentes a su naturaleza heteróloga. La tendencia actual en la investigación de la próxima generación en terapia antiofídica es mejorar su eficacia y seguridad apuntando a neutralizar las toxinas más abundantes de los venenos de serpientes. En este sentido, la inhibición de enzimas por compuestos naturales y/o sintéticos puede representar un valioso complemento. Las fosfolipasas A2 (PLA2s) son unos de los principales componentes de venenos de vipéridos. En este trabajo se estudió la capacidad inhibidora de silimarina, un extracto de cardo mariano (contiene principalmente silibina), de la actividad fosfolipasa inducida por los venenos Bothrops alternatus y Crotalus durissus terrificus y de la miotoxicidad inducida por este último, por método de pre incubación. Se realizaron dos métodos de inhibición, uno in vitro, la actividad hemolítica indirecta utilizando placas de agar-sangre y, otro in vivo, de miotoxicidad donde se determinó la actividad de la enzima creatina quinasa (CK) de suero de ratones. Se realizó el análisis de la varianza, por el método de comparación de Tukey (p‹0,05), utilizando el software InfoStat. Se utilizó silimarina en una mezcla dimetilsulfóxido (DMSO) o etanol en PBS (no superando la proporción de DMSO o etanol en el volumen final de la mezcla del 16% para ensayos in vitro y del 8% para ensayos in vivo) y se ensayaron diferentes relaciones de veneno:silimarina (m:m) pre incubadas por 30 minutos a 37°C y los respectivos controles de veneno sin inhibidor y solventes utilizados. Se determinaron las concentraciones “de reto” de los venenos de B. alternatus (1,2 mg/mL) y C. d. terrificus (0,6 mg/mL) para los ensayos de inhibición in vitro. Se determinó la concentración efectiva 50 (CE50), obteniéndose los valores de 2,08 y 2,81 mg/mL de silimarina para inhibir el 50% de la actividad hemolítica indirecta del veneno de C. d. terrificus, disuelta en etanol y DMSO, respectivamente. Se seleccionó el solvente DMSO (debido a la mayor solubilidad de silimarina en el mismo) para evaluar la inhibición de la miotoxicidad y se observó que la relación de silimarina:veneno (m:m) 20:1 presentó una inhibición significativa de la actividad CK de suero de ratones tratados (83,3 ± 11,1 UI/L) respecto del control de veneno (618,0 ± 54,2 UI/L). Silimarina fue eficiente en inhibir las PLA2s del veneno de C. d. terrificus, tanto en ensayos in vitro como in vivo, por método de pre incubación. Presentó, además, una inhibición parcial in vitro de las PLA2s del veneno de B. alternatus. Futuros estudios, como el tratamiento con silimarina post-inoculación del veneno, serán realizados para evaluar su potencial farmacológico en el tratamiento complementario de los accidentes ofídicos.
Materia
Actividad hemolítica indirecta
Bothrops alternatus
Crotalus durissus terrificus
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Repositorio
Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)
Institución
Universidad Nacional del Nordeste
OAI Identificador
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Actualmente, el único tratamiento eficaz es la administración intravenosa del antiveneno específico que puede acarrear problemas inherentes a su naturaleza heteróloga. La tendencia actual en la investigación de la próxima generación en terapia antiofídica es mejorar su eficacia y seguridad apuntando a neutralizar las toxinas más abundantes de los venenos de serpientes. En este sentido, la inhibición de enzimas por compuestos naturales y/o sintéticos puede representar un valioso complemento. Las fosfolipasas A2 (PLA2s) son unos de los principales componentes de venenos de vipéridos. En este trabajo se estudió la capacidad inhibidora de silimarina, un extracto de cardo mariano (contiene principalmente silibina), de la actividad fosfolipasa inducida por los venenos Bothrops alternatus y Crotalus durissus terrificus y de la miotoxicidad inducida por este último, por método de pre incubación. Se realizaron dos métodos de inhibición, uno in vitro, la actividad hemolítica indirecta utilizando placas de agar-sangre y, otro in vivo, de miotoxicidad donde se determinó la actividad de la enzima creatina quinasa (CK) de suero de ratones. Se realizó el análisis de la varianza, por el método de comparación de Tukey (p‹0,05), utilizando el software InfoStat. Se utilizó silimarina en una mezcla dimetilsulfóxido (DMSO) o etanol en PBS (no superando la proporción de DMSO o etanol en el volumen final de la mezcla del 16% para ensayos in vitro y del 8% para ensayos in vivo) y se ensayaron diferentes relaciones de veneno:silimarina (m:m) pre incubadas por 30 minutos a 37°C y los respectivos controles de veneno sin inhibidor y solventes utilizados. Se determinaron las concentraciones “de reto” de los venenos de B. alternatus (1,2 mg/mL) y C. d. terrificus (0,6 mg/mL) para los ensayos de inhibición in vitro. Se determinó la concentración efectiva 50 (CE50), obteniéndose los valores de 2,08 y 2,81 mg/mL de silimarina para inhibir el 50% de la actividad hemolítica indirecta del veneno de C. d. terrificus, disuelta en etanol y DMSO, respectivamente. Se seleccionó el solvente DMSO (debido a la mayor solubilidad de silimarina en el mismo) para evaluar la inhibición de la miotoxicidad y se observó que la relación de silimarina:veneno (m:m) 20:1 presentó una inhibición significativa de la actividad CK de suero de ratones tratados (83,3 ± 11,1 UI/L) respecto del control de veneno (618,0 ± 54,2 UI/L). Silimarina fue eficiente en inhibir las PLA2s del veneno de C. d. terrificus, tanto en ensayos in vitro como in vivo, por método de pre incubación. Presentó, además, una inhibición parcial in vitro de las PLA2s del veneno de B. alternatus. Futuros estudios, como el tratamiento con silimarina post-inoculación del veneno, serán realizados para evaluar su potencial farmacológico en el tratamiento complementario de los accidentes ofídicos.Universidad Nacional del Nordeste. Secretaría General de Ciencia y TécnicaGay, Claudia CarolinaFusco, Luciano Sebastian2025-06-11info:eu-repo/semantics/conferenceObjectinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_5794info:ar-repo/semantics/documentoDeConferenciaapplication/pdfp. 1-2application/pdfRicciardi Soloaga, Sol Bianca, 2025. Evaluación in vitro e in vivo del efecto de silimarina para inhibir la actividad fosfolipásica de venenos de serpientes del nordeste argentino. En: XXX Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas. Resistencia: Universidad Nacional del Nordeste. Secretaría General de Ciencia y Técnica, p. 1-2.https://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/60667spaUNNE/PI/21F019/AR. 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La incidencia de accidentes ofídicos en la Argentina puede superar los 150 casos por 100.000 habitantes por año, siendo las mordeduras del género Bothrops (yararás) las predominantes en un 96,6%, seguido de las de Crotalus (cascabel) con un 2,8%. Actualmente, el único tratamiento eficaz es la administración intravenosa del antiveneno específico que puede acarrear problemas inherentes a su naturaleza heteróloga. La tendencia actual en la investigación de la próxima generación en terapia antiofídica es mejorar su eficacia y seguridad apuntando a neutralizar las toxinas más abundantes de los venenos de serpientes. En este sentido, la inhibición de enzimas por compuestos naturales y/o sintéticos puede representar un valioso complemento. Las fosfolipasas A2 (PLA2s) son unos de los principales componentes de venenos de vipéridos. En este trabajo se estudió la capacidad inhibidora de silimarina, un extracto de cardo mariano (contiene principalmente silibina), de la actividad fosfolipasa inducida por los venenos Bothrops alternatus y Crotalus durissus terrificus y de la miotoxicidad inducida por este último, por método de pre incubación. Se realizaron dos métodos de inhibición, uno in vitro, la actividad hemolítica indirecta utilizando placas de agar-sangre y, otro in vivo, de miotoxicidad donde se determinó la actividad de la enzima creatina quinasa (CK) de suero de ratones. Se realizó el análisis de la varianza, por el método de comparación de Tukey (p‹0,05), utilizando el software InfoStat. Se utilizó silimarina en una mezcla dimetilsulfóxido (DMSO) o etanol en PBS (no superando la proporción de DMSO o etanol en el volumen final de la mezcla del 16% para ensayos in vitro y del 8% para ensayos in vivo) y se ensayaron diferentes relaciones de veneno:silimarina (m:m) pre incubadas por 30 minutos a 37°C y los respectivos controles de veneno sin inhibidor y solventes utilizados. Se determinaron las concentraciones “de reto” de los venenos de B. alternatus (1,2 mg/mL) y C. d. terrificus (0,6 mg/mL) para los ensayos de inhibición in vitro. Se determinó la concentración efectiva 50 (CE50), obteniéndose los valores de 2,08 y 2,81 mg/mL de silimarina para inhibir el 50% de la actividad hemolítica indirecta del veneno de C. d. terrificus, disuelta en etanol y DMSO, respectivamente. Se seleccionó el solvente DMSO (debido a la mayor solubilidad de silimarina en el mismo) para evaluar la inhibición de la miotoxicidad y se observó que la relación de silimarina:veneno (m:m) 20:1 presentó una inhibición significativa de la actividad CK de suero de ratones tratados (83,3 ± 11,1 UI/L) respecto del control de veneno (618,0 ± 54,2 UI/L). Silimarina fue eficiente en inhibir las PLA2s del veneno de C. d. terrificus, tanto en ensayos in vitro como in vivo, por método de pre incubación. Presentó, además, una inhibición parcial in vitro de las PLA2s del veneno de B. alternatus. Futuros estudios, como el tratamiento con silimarina post-inoculación del veneno, serán realizados para evaluar su potencial farmacológico en el tratamiento complementario de los accidentes ofídicos.
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