Estudio preliminar del efecto del paclitaxel en células HT29 de cáncer colorrectal mediante técnicas citoquímicas
- Autores
- Catracchia, Marco Sebastian
- Año de publicación
- 2025
- Idioma
- español castellano
- Tipo de recurso
- documento de conferencia
- Estado
- versión publicada
- Descripción
- Fil: Catracchia, Marco Sebastian. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.
Fil: Olea, Gabriela Beatriz. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.
Fil: Aguirre, María Victoria. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.
El cáncer colorrectal (CCR) es una de las principales causas de morbimortalidad a nivel mundial, siendo la tercera neoplasia más común. A pesar de los avances en el diagnóstico temprano, la cirugía y las terapias oncológicas, sigue existiendo una elevada tasa de mortalidad asociada principalmente a la resistencia que desarrollan dichas células tumorales frente a los tratamientos convencionales. Este desafío ha impulsado la búsqueda de nuevos agentes terapéuticos o de la reutilización de fármacos existentes con eficacia probada en otros tipos de cáncer. En este marco, el presente estudio evaluó el efecto del Paclitaxel, un agente quimioterapéutico de la familia de los taxanos ampliamente utilizado en cánceres como el de mama y ovario, pero poco explorado en el contexto del CCR. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto citotóxico del Paclitaxel sobre la línea celular HT29 de adenocarcinoma colorrectal, mediante el análisis de cambios morfológicos y bioquímicos compatibles con apoptosis, utilizando técnicas citológicas (H&E) y citoquímicas (PAS), con el fin de explorar su potencial como agente terapéutico alternativo en el tratamiento de este tipo de cancer. La línea celular HT29 se cultivó en medio McCoy’s 5A suplementado con suero fetal bovino al 10%, en condiciones estándar de cultivo (37°C, 5% de dióxido de carbono) y elevada humedad. Una vez alcanzado entre 80-90% de confluencia, las células fueron tratadas con concentraciones crecientes de Paclitaxel (1, 10, 50 y 100 nM) durante 24 horas. Posteriormente, se aplicaron tinciones histológicas y citoquímicas con el fin de observar los efectos estructurales y bioquímicos del fármaco. La tinción con Hematoxilina y Eosina (H&E), herramienta básica en histología, permitió identificar alteraciones morfológicas propias del proceso apoptótico. En el grupo control, las células conservaron su estructura epitelial organizada, con núcleos vesiculosos y citoplasmas uniformes. Sin embargo, tras el tratamiento con Paclitaxel, especialmente a partir de 10 nM, se observaron signos característicos de apoptosis como la condensación de la cromatina, retracción citoplasmática, pérdida de adhesión y formación de cuerpos apoptóticos. Estas alteraciones fueron más evidentes a concentraciones de 50 y 100 nM, donde la mayoría de las células mostraban morfología alterada y una pérdida generalizada de la arquitectura celular. En paralelo, se utilizó la técnica de ácido periódico de Schiff (PAS) para detectar glicoconjugados intracelulares, como glucógeno y mucinas. Las células no tratadas mostraron una tinción PAS débil, limitada a regiones específicas. Tras la administración de Paclitaxel, se observó un incremento en la positividad de la tinción, particularmente a 10 nM, lo que sugiere un cambio en el metabolismo celular. Este patrón se mantuvo o incluso se acentuó en concentraciones más altas, reflejando alteraciones bioquímicas compatibles con procesos de estrés o muerte celular. En conjunto, los resultados obtenidos demuestran que el Paclitaxel induce cambios estructurales y metabólicos en las células HT29, compatibles con apoptosis, de forma dependiente de la dosis. Aunque las técnicas de H&E y PAS no son específicas para apoptosis, permiten obtener una aproximación inicial al efecto citotóxico del fármaco. El presente estudio refuerza la hipótesis de que el Paclitaxel puede tener utilidad en el tratamiento del CCR, pese a que actualmente no forma parte del protocolo estándar para esta neoplasia. Sus efectos citotóxicos, evidenciados tanto en la estructura celular como en su composición bioquímica, abren la puerta a futuras investigaciones que profundicen en sus mecanismos de acción y en posibles combinaciones con otros agentes terapéuticos. Futuros trabajos podrían incluir ensayos moleculares más específicos, como la detección de caspasas activadas o la fragmentación del ADN, para confirmar la inducción de apoptosis. Asimismo, sería útil validar estos hallazgos en modelos tridimensionales o animales, que permitan observar el comportamiento del fármaco en un entorno más representativo del tejido tumoral in vivo y la utilización de células normales como control. En conclusión, los hallazgos aquí presentados muestran que el Paclitaxel presenta un efecto significativo sobre la viabilidad de las células HT29 de CCR, induciendo cambios morfológicos y metabólicos que apuntan a una muerte celular programada. - Materia
-
Cáncer
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Citoquímico - Nivel de accesibilidad
- acceso abierto
- Condiciones de uso
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Este desafío ha impulsado la búsqueda de nuevos agentes terapéuticos o de la reutilización de fármacos existentes con eficacia probada en otros tipos de cáncer. En este marco, el presente estudio evaluó el efecto del Paclitaxel, un agente quimioterapéutico de la familia de los taxanos ampliamente utilizado en cánceres como el de mama y ovario, pero poco explorado en el contexto del CCR. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto citotóxico del Paclitaxel sobre la línea celular HT29 de adenocarcinoma colorrectal, mediante el análisis de cambios morfológicos y bioquímicos compatibles con apoptosis, utilizando técnicas citológicas (H&E) y citoquímicas (PAS), con el fin de explorar su potencial como agente terapéutico alternativo en el tratamiento de este tipo de cancer. La línea celular HT29 se cultivó en medio McCoy’s 5A suplementado con suero fetal bovino al 10%, en condiciones estándar de cultivo (37°C, 5% de dióxido de carbono) y elevada humedad. Una vez alcanzado entre 80-90% de confluencia, las células fueron tratadas con concentraciones crecientes de Paclitaxel (1, 10, 50 y 100 nM) durante 24 horas. Posteriormente, se aplicaron tinciones histológicas y citoquímicas con el fin de observar los efectos estructurales y bioquímicos del fármaco. La tinción con Hematoxilina y Eosina (H&E), herramienta básica en histología, permitió identificar alteraciones morfológicas propias del proceso apoptótico. En el grupo control, las células conservaron su estructura epitelial organizada, con núcleos vesiculosos y citoplasmas uniformes. Sin embargo, tras el tratamiento con Paclitaxel, especialmente a partir de 10 nM, se observaron signos característicos de apoptosis como la condensación de la cromatina, retracción citoplasmática, pérdida de adhesión y formación de cuerpos apoptóticos. Estas alteraciones fueron más evidentes a concentraciones de 50 y 100 nM, donde la mayoría de las células mostraban morfología alterada y una pérdida generalizada de la arquitectura celular. En paralelo, se utilizó la técnica de ácido periódico de Schiff (PAS) para detectar glicoconjugados intracelulares, como glucógeno y mucinas. Las células no tratadas mostraron una tinción PAS débil, limitada a regiones específicas. Tras la administración de Paclitaxel, se observó un incremento en la positividad de la tinción, particularmente a 10 nM, lo que sugiere un cambio en el metabolismo celular. Este patrón se mantuvo o incluso se acentuó en concentraciones más altas, reflejando alteraciones bioquímicas compatibles con procesos de estrés o muerte celular. En conjunto, los resultados obtenidos demuestran que el Paclitaxel induce cambios estructurales y metabólicos en las células HT29, compatibles con apoptosis, de forma dependiente de la dosis. Aunque las técnicas de H&E y PAS no son específicas para apoptosis, permiten obtener una aproximación inicial al efecto citotóxico del fármaco. El presente estudio refuerza la hipótesis de que el Paclitaxel puede tener utilidad en el tratamiento del CCR, pese a que actualmente no forma parte del protocolo estándar para esta neoplasia. Sus efectos citotóxicos, evidenciados tanto en la estructura celular como en su composición bioquímica, abren la puerta a futuras investigaciones que profundicen en sus mecanismos de acción y en posibles combinaciones con otros agentes terapéuticos. Futuros trabajos podrían incluir ensayos moleculares más específicos, como la detección de caspasas activadas o la fragmentación del ADN, para confirmar la inducción de apoptosis. 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