Efectos antioxidante e inhibitorio de ONSi de fitocomplejos fenólicos de Caesalpinia paraguariensis sobre un modelo celular humano inflamatorio

Autores
Pastoriza, Ana Cristina; Sgariglia, Melina Araceli; Soberon, Jose Rodolfo
Año de publicación
2023
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
En trabajos previos demostramos la actividad antioxidante e inhibitoria de enzimas inflamatorias de extractos de corteza de Caesalpinia paraguariensis (Guayacán)[1], así como la ausencia de citotoxicidad sobre linfocitos humanos cultivados [2]. En este trabajo evaluamos los efectos antioxidante intracelular e inhibitorio de la enzima Oxido Nitrico Sintasa inducible (ONSi) de fitocomplejos (FCXs) fenólicos de corteza de C. paraguariensis, sobre cultivos de macrófagos humanos activados, y analizamos la composición química del FCX más activo. Metodología: El extracto metanólico obtenido por Soxhlet (45 g), se secó y se trató con acetona para separar los compuestos fenólicos, esta fracción fue sub-fraccionada por CC-flash de silicagel con gradiente Hexano/AcOEt/MeOH, cuyo análisis por CCF dio lugar a tres FCXs (C1, C2 y C3). Estas se secaron, pesaron y disolvieron en DMSO, para ser ensayadas entre 1-100 µg/mL (concentraciones sub-citotóxicas evaluadas con MTT) sobre la línea celular HL-60 (ATCC CCL 240) diferenciada a macrófagos con PMA, cultivados en RPMI 1640, 5% CO2, 37 °C, y activados con LPS. Los macrófagos (105 cel/ml) se trataron durante 3 hs con los FCXs, controles positivos, y de activación. Luego se incubaron 48 hs, y se midió la conc. de NO2- en sobrenadante de cultivo (Griess, 540 nm). La actividad antioxidante intracelular (AAOIC) se midió con sonda fluorescente (DA-H2DCF, Ex/Em 485/530nm) después de inducir estrés oxidativo con H2O2. El FCX más activo fue analizado por UHPLC-MS/MS. Resultados: Los tres FCXs inhibieron a ONSi, a 10 µg/mL; C1, C2 y C3 mostraron inhibiciones del 53,9%, 70,4% y 55,95% respectivamente, este efecto incrementó levemente con la conc. Además, exhibieron buena AAOIC; a 50 µg/mL, C1 y C2 redujeron la oxidación en un 100%, mientras que C3 logró una reducción del 86,47%. El análisis fitoquímico de C2 (FCX más activo) permitió la detección de ác. gálico, ác. elágico y dos CH3-derivados, ác. caroboxilelágico dimerizado, galoflavina dimerizada, isocoumarina, 3 y 7 glicoflavonoles y quercitrina 6, 8, 2´,3´-tetrametoxilada. Conclusiones: C2 destacó como el fitocomplejo más efectivo. Estos resultados contribuyen al avance en la investigación de la actividad antiinflamatoria de estos FCXs.
Fil: Pastoriza, Ana Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Estudios Vegetales. Cátedra de Fitoquímica; Argentina
Fil: Sgariglia, Melina Araceli. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Estudios Vegetales. Cátedra de Fitoquímica; Argentina
Fil: Soberon, Jose Rodolfo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Estudios Vegetales. Cátedra de Fitoquímica; Argentina
XXX Congreso Peruano de Química; XXX Congreso Italo Latinoamericano de Etnomedicina
Lima
Perú
Sociedad Química del Perú
Sociedad Italo Latinoamericana de Etnomedicina
Materia
FITOQUIMICA
FITOCOMPLEJOS
iNOS
ANTIOXIDANTES
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
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Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
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Fil: Pastoriza, Ana Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Estudios Vegetales. Cátedra de Fitoquímica; Argentina
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