Efecto modulador inflamatorio sobre macrófagos humanos por fitocomplejos fenólicos de Ggeoffroea decorticans, y análisis de sus constituyentes bioactivos
- Autores
- Pastoriza, Ana Cristina; Soberon, Jose Rodolfo; Sgariglia, Melina Araceli
- Año de publicación
- 2024
- Idioma
- español castellano
- Tipo de recurso
- documento de conferencia
- Estado
- versión publicada
- Descripción
- En trabajos previos demostramos la ausencia de citotoxicidad de fitocomplejos (FCXs) fenólicos de corteza de Geoffroea decorticans sobre linfocitos humanos. En este trabajo se determinó la inhibición de la producción de NO por la iNOS en cultivos de macrófagos humanos activados, así como la capacidad antioxidante en el mismo modelo celular; y se analizó la composición química del FCX más activo.Metodología: El extracto metanólico obtenido por Soxhlet (1 g), se secó y se trató con acetona para separar los compuestos fenólicos, éstos se subfraccionaron por SPE C18 con metanol:agua (4:6 v/v) y metanol (100%), para obtener dos FCXs (PGF1 y PGF2). Estos se secaron, pesaron y disolvieron en DMSO, y se ensayaron entre 0,25-5,00 μg/mL (concentraciones subcitotóxicas ensayadas con MTT) sobre macrófagos HL-60 (ATCC CCL 240) (105 cel/mL) cultivados en RPMI 1640, 5% CO2, 37°C con LPS, durante 48 hs, con los correspondientes controles. Se midió la conc. de NO2- en sobrenadante de cultivo (Griess, 540 nm).La actividad antioxidante intracelular (AAOIC) se midió con sonda fluorescente (DA-H2DCF, Ex/Em 485/530nm) después de inducir estrés oxidativo con H2O2 100 μM. El FCX más activo fue analizado por CCF 2D y UHPLC(DAD)-ESI-MS(Q-TOF). Resultados: Los dos FCXs inhibieron la producción de NO a las concentraciones evaluadas, mostrando mejor efecto a 1 μg/mL (PGF1: 85,20%; PGF2: 74,70%). Además, exhibieron buena AAOIC; a 1 μg/mL (PGF1) y a 5 μg/mL (PGF2) redujeron la oxidación en un 100%. El análisis fitoquímico de PGF1(FCX más activo) permitió la detección de 5-hidroxibowdichiona; citrato de galoil malonilo y los ácidos 8-hidroxi-9-oxo-9H xanteno-1,3-dicarboxílico, metilendigálico, protocatéquico, clorogénico y gálico; reportados por primera vez en corteza de G. decorticans. Conclusiones: PGF1 destacó como el FCX más efectivo, modulando la inflamación inducida por LPS al disminuir la sobreproducción de NO (iNOS) y el estrés oxidativo celular inducido. El efecto se debería a uno o más de los compuestos identificados en PGF1, lo cual es objeto de investigaciones en desarrollo.
Fil: Pastoriza, Ana Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Estudios Vegetales. Cátedra de Fitoquímica; Argentina
Fil: Soberon, Jose Rodolfo. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Estudios Vegetales. Cátedra de Fitoquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; Argentina
Fil: Sgariglia, Melina Araceli. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Estudios Vegetales. Cátedra de Fitoquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; Argentina
XLI Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán
San Miguel de Tucumán
Argentina
Asociación de Biología de Tucumán - Materia
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MODULADORES INFLAMATORIOS
FITOCOMPLEJOS FENOLICOS
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- acceso abierto
- Condiciones de uso
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En trabajos previos demostramos la ausencia de citotoxicidad de fitocomplejos (FCXs) fenólicos de corteza de Geoffroea decorticans sobre linfocitos humanos. En este trabajo se determinó la inhibición de la producción de NO por la iNOS en cultivos de macrófagos humanos activados, así como la capacidad antioxidante en el mismo modelo celular; y se analizó la composición química del FCX más activo.Metodología: El extracto metanólico obtenido por Soxhlet (1 g), se secó y se trató con acetona para separar los compuestos fenólicos, éstos se subfraccionaron por SPE C18 con metanol:agua (4:6 v/v) y metanol (100%), para obtener dos FCXs (PGF1 y PGF2). Estos se secaron, pesaron y disolvieron en DMSO, y se ensayaron entre 0,25-5,00 μg/mL (concentraciones subcitotóxicas ensayadas con MTT) sobre macrófagos HL-60 (ATCC CCL 240) (105 cel/mL) cultivados en RPMI 1640, 5% CO2, 37°C con LPS, durante 48 hs, con los correspondientes controles. Se midió la conc. de NO2- en sobrenadante de cultivo (Griess, 540 nm).La actividad antioxidante intracelular (AAOIC) se midió con sonda fluorescente (DA-H2DCF, Ex/Em 485/530nm) después de inducir estrés oxidativo con H2O2 100 μM. El FCX más activo fue analizado por CCF 2D y UHPLC(DAD)-ESI-MS(Q-TOF). Resultados: Los dos FCXs inhibieron la producción de NO a las concentraciones evaluadas, mostrando mejor efecto a 1 μg/mL (PGF1: 85,20%; PGF2: 74,70%). Además, exhibieron buena AAOIC; a 1 μg/mL (PGF1) y a 5 μg/mL (PGF2) redujeron la oxidación en un 100%. El análisis fitoquímico de PGF1(FCX más activo) permitió la detección de 5-hidroxibowdichiona; citrato de galoil malonilo y los ácidos 8-hidroxi-9-oxo-9H xanteno-1,3-dicarboxílico, metilendigálico, protocatéquico, clorogénico y gálico; reportados por primera vez en corteza de G. decorticans. Conclusiones: PGF1 destacó como el FCX más efectivo, modulando la inflamación inducida por LPS al disminuir la sobreproducción de NO (iNOS) y el estrés oxidativo celular inducido. El efecto se debería a uno o más de los compuestos identificados en PGF1, lo cual es objeto de investigaciones en desarrollo. |
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